脂肪间充质干细胞外泌体对人子宫内膜异位症细胞纤维化形成的影响

作     者：李冰冰 丁美琪 孙新慧 王荣 LI Bingbing;DING Meiqi;SUN Xinhui;WANG Rong

作者机构：济宁医学院山东济宁272000 北京中医药大学北京100029 

出 版 物：《药物评价研究》 (Drug Evaluation Research)

年 卷 期：2024年第47卷第9期

页      面：2032-2040页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金委员会项目(82104920) 山东省自然科学基金委员会项目(ZR2021QH129) 山东省中医药重点学科方剂学(鲁卫中医药科教字4号) 

主　　题：脂肪间充质干细胞 外泌体 子宫内膜异位症 纤维化 吞噬 

摘      要：目的探讨脂肪间充质干细胞外泌体(ADSCs-Exos)对子宫内膜异位症细胞(12Z)增殖以及纤维化相关因子表达的影响。方法采用超速离心法提取ADSCs-Exos,并通过透射电镜(TEM)、纳米颗粒跟踪分析(NTA)、Western blotting鉴定;采用PKH26标记外泌体法观察12Z细胞对外泌体的吞噬内化情况;采用CCK-8法检测ADSCs-Exos(12.5、25.0、50.0μg·mL^(-1))对12Z细胞增殖的影响;将12Z细胞分为:对照组、模型组、ADSCs-Exos(12.5、25.0、50.0μg·mL^(-1))组,除对照组外,其余各组采用TGF-β1(5 ng·mL^(-1))诱导细胞纤维化,给药24 h后采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测纤维化因子基因mRNA的表达。结果提取的ADSCs-Exos呈现圆形颗粒,清晰可见;总萃取物的平均粒径为122.6 nm,浓度为1.8×10^(6)颗粒·mL^(-1);CD9、CD63和TSG101在ADSCs-Exos均有表达,且Calnexin蛋白未表达,符合外泌体的特征。12Z细胞可以成功将ADSCs-Exos吞噬内化;CCK-8检测结果显示,与对照组相比,采用25μg·mL^(-1)ADSCs-Exos干预24 h后12Z细胞的相对存活率显著降低(P0.01)。qRT-PCR结果显示,与对照组相比,模型组细胞的CTGF、COL1A1、α-SMA mRNA表达水平显著升高(P0.001);与模型组比较,12.5、25.0μg·mL^(-1)ADSCs-Exos组CTGF、COL1A1、α-SMA mRNA表达水平降低(P0.05、0.01、0.001);50.0μg·mL^(-1)ADSCs-Exos组α-SMA mRNA表达水平明显降低(P0.001)。结论ADSCs-Exos可被12Z细胞所吞噬,抑制12Z细胞的增殖,并且降低细胞纤维化相关因子基因的表达水平。