汉麻籽中靶向抑制胰脂肪酶/胆固醇酯酶多肽的快速鉴定筛选及活性探究

作     者：尹浩 朱将雄 钟宇 王丹凤 邓云 章敏燕 赵芳 

作者机构：上海交通大学农业与生物学院 上海交通大学云南(大理)研究院 云南省大理白族自治州洱源县检验检测院 

出 版 物：《食品工业科技》 (Science and Technology of Food Industry)

年 卷 期：2024年

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083201[工学-食品科学] 

基　　金：云南省基础研究计划项目(202301AS070014) 国家科技部“十四五”重点研发(子课题)(2023YFF1104302-1) 

主　　题：生物活性肽 酶抑制 肽组学 虚拟筛选 分子对接 

摘      要：本研究旨在快速筛选鉴定汉麻籽蛋白水解物（Hemp seed protein hydrolysates， HSPHs）中的胰脂肪酶（Pancreatic lipase， PL）和胆固醇酯酶（Cholesterol esterase， CE）抑制肽，验证其活性并初步分析其分子机制。首先探究了HSPHs在不同缓冲液体系下的PL和CE抑制活性，然后通过超滤、肽组学和虚拟筛选相结合的方法对PL和CE抑制肽进行快速鉴定筛选，最后验证其活性并采用分子对接探究分子相互作用类型。研究发现，与常规缓冲液体系相比，模拟肠液体系减弱了HSPHs对PL的抑制作用，但提高了对CE的抑制作用，因此后续采用模拟肠液体系检测PL和CE抑制活性。碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶HSPHs中小于3 kDa的部分具有最高的PL/CE抑制活性，对其多肽序列进行鉴定后选取含量和潜在活性较高的136条多肽建立候选肽库，从中鉴定出14种结合能较低的PL和CE抑制肽。体外活性验证表明APAM和RLPA对PL和CE同时表现出良好的抑制能力。分子对接结果表明APAM和RLPA可能通过与酶活性位点及位点表面环中的残基发生氢键和疏水作用来限制酶活性位点的暴露以及反应底物的进入，从而抑制PL和CE的活性。本研究表明汉麻籽是开发控制脂质消化酶抑制肽的潜在来源，为后续开发汉麻籽降脂肽产品提供了参考依据。