H_(2)O_(2)抑制ERK通路诱导L-O2细胞铁死亡

作     者：罗一帆 张宗丽 张嘉鑫 蔡大鑫 杨蕊源 席世兵 李涛 LUO Yi-fan;ZHANG Zong-li;ZHANG Jia-xin;CAI Da-xin;YANG Rui-yuan;XI Shi-bing;LI Tao

作者机构：湖北医药学院附属太和医院儿科湖北十堰442000 湖北医药学院附属太和医院儿科疾病研究所湖北十堰442000 湖北医药学院第一临床学院湖北十堰442000 

出 版 物：《湖北医药学院学报》 (Journal of Hubei University of Medicine)

年 卷 期：2024年第43卷第4期

页      面：380-384,389,I0001,F0004页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：湖北省科技厅青年项目(2021CFB270) 湖北省大学生创新创业训练计划项目(S202210929013) 湖北医药学院研究生科技创新项目(YC2022039) 

主　　题：铁死亡 过氧化氢 L-O2细胞 ERK信号通路 线粒体膜电位 

摘      要：目的:探讨过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导人肝实质细胞(L-O2细胞)铁死亡的作用及潜在机制。方法:采用不同浓度梯度H_(2)O_(2)刺激L-O2细胞,分别于处理12、24 h后使用CCK-8法检测细胞存活率,从而确定最有效的H_(2)O_(2)诱导条件。在实验中设立了以下处理组:空白对照组、H_(2)O_(2)组、Erastin组、H_(2)O_(2)+Fer-1组;确定H_(2)O_(2)可诱导L-O2细胞发生铁死亡,为了进一步明确具体的机制,细胞分为空白对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+不同浓度的ERK激动剂以及ERK抑制剂,使用试剂盒检测各处理组的细胞死亡情况、ROS水平和MMP水平,利用RT-qPCR检测铁死亡标记物PTGS2和ACSL4 mRNA表达水平。结果:800μmol/L H_(2)O_(2)刺激24 h可诱导L-O2细胞死亡;与空白对照组相比,H_(2)O_(2)组和Erastin组细胞受损明显,细胞内ROS水平升高、MMP水平显著降低,同时PTGS2和ACSL4 mRNA的表达水平升高;与H_(2)O_(2)组相比,H_(2)O_(2)+Fer-1组细胞受损减弱,细胞内ROS水平降低、MMP水平恢复,PTGS2和ACSL4 mRNA的表达水平降低。与H_(2)O_(2)组相比,H_(2)O_(2)+ERK激动剂组细胞受损减弱,细胞内ROS水平降低、MMP水平恢复、PTGS2和ACSL4 mRNA的表达水平降低;然而,加入ERK抑制剂组则出现了相反的结果。结论:800μmol/L的H_(2)O_(2)处理24 h能显著诱导L-O2细胞发生铁死亡,且此过程可能主要通过ERK通路的抑制作用来实现。