犬和猫皮肤癣菌三重荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作     者：徐博 郭思宇 纪佳豪 李梓豪 刘文扬 勾永志 白二钢 李睿文 XU Bo;GUO Si-yu;JI Jia-hao;LI Zi-hao;LIU Wen-yang;GOU Yong-zhi;BAI Er-gang;LI Rui-wen

作者机构：河北农业大学动物医学院河北保定071000 保定市动物疾病预防控制中心河北保定071000 河北创安生物科技有限公司河北保定071000 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2024年第45卷第9期

页      面：56-60页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：河北省高等学校科学技术研究项目(ZC2023056) 

主　　题：犬和猫皮肤病 犬小孢子菌 须癣毛癣菌 秕糠马拉色菌 三重荧光PCR 

摘      要：建立鉴别犬小孢子菌(Microsporum canis,MC)、须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes,TM)和秕糠马拉色菌(Malassezia furfur,MF)的三重荧光PCR检测方法,根据MC、TM和MF 3种真菌的ITS基因保守序列设计引物和探针,建立三重荧光PCR检测方法。所建立的三重荧光PCR方法仅对MC、TM和MF出现阳性扩增,与大肠埃希氏菌、产色葡萄球菌和铜绿假单胞菌等犬、猫皮肤病常见病原无交叉反应,对MC、TM和MF的最低检出限分别为1.36×10^(1)、1.35×10^(1)、1.33×10^(1)拷贝;组内和组间变异系数均小于2%,重复性好。应用建立三重荧光PCR方法对88份犬、猫临床样品进行检测,结果检出1份MC阳性、21份TM阳性、20份MF阳性,检测结果与单一荧光PCR方法一致。该方法可对MC、TM和MF同时快速检测,可用于犬、猫真菌性皮肤病的快速诊断。