肉制品中牛源性成分芯片数字PCR定量检测方法的建立

作     者：邓迎春 郭旭光 苏利霞 陶健 DENG Yingchun;GUO Xuguang;SU Lixia;TAO Jian

作者机构：河南省食品和盐业检验技术研究院国家市场监管重点实验室(食品安全快速检测与智慧监管技术)河南郑州450003 

出 版 物：《中国食品卫生杂志》 (Chinese Journal of Food Hygiene)

年 卷 期：2024年第36卷第5期

页      面：533-540页

核心收录：

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100403[医学-营养与食品卫生学] 10[医学] 

基　　金：河南省市场局科技项目(2022sj21) 河南省科技计划项目(222102410011) 

主　　题：牛源性成分 芯片数字PCR 肉制品 拷贝数 定量检测 

摘      要：目的为了对肉制品中牛肉源性成分进行准确定量,本文采用数字PCR(dPCR)技术对牛肉的线粒体Cytb基因进行定量检测,根据基因拷贝数建立了肉制品中牛肉源性成分PCR的定量检测方法。方法参照标准设计的牛源性特异性引物、探针,猪源性特异性引物、探针,鸭源性特异性引物、探针以及动物源性成分通用引物、探针,建立了双重数字PCR体系。结果在一定范围内生鲜牛肉质量与DNA含量、DNA含量与DNA拷贝数之间均呈现明显的线性关系,并以DNA含量为中间值计算出DNA拷贝数(C)与生鲜牛肉质量之间的换算公式:M_(牛)=0.0209C+0.676。应用建立的dPCR方法对构建的肉样模型进行检测,结果显示牛肉定量检测值与实际质量基本一致,且受外源物种的干扰小。运用该方法对抽取的10份市售牛肉样品检测,同时通过特异/通用引物扩增的拷贝数之比(%)辅助判断肉制品中是否存在非牛源性的其他动物源性成分掺假,检测出部分样品不符合标签规定。结论该方法可实现对牛源性成分的量化检测,能够作为区分故意添加和无意污染的依据,为执法监管部门提供有力的技术保障。