抗癌胚抗原噬菌体单链抗体库的构建和筛选鉴定

作     者：陈团结 梁红远 陈湛昊 王明辉 瞿爱东 陈哲文 Chen Tuanjie;Liang Hongyuan;Chen Zhanhao;Wang Minghui;Qu Aidong;Chen Zhewen

作者机构：上海生物制品研究所有限责任公司第四研究室上海200051 上海生物制品研究所有限责任公司第一研究室上海200051 上海生物制品研究所有限责任公司上海201403 

出 版 物：《国际生物制品学杂志》 (International Journal of Biologicals)

年 卷 期：2024年第47卷第4期

页      面：191-196页

学科分类：10[医学] 

主　　题：噬菌体库 单链抗体 癌胚抗原 肿瘤 

摘      要：目的以癌胚抗原相关黏附分子5(carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5,CEA)作为靶点,构建靶向于CEA的噬菌体单链抗体(single-chain fragment variable,ScFv)免疫库,并通过筛选获得靶向该抗原的抗体。方法通过分子克隆的方法将小鼠脾脏中的抗体序列与噬菌体质粒构建获得重组噬菌体质粒,并经电转化导入大肠埃希菌TG1菌株中,再使用M13KO7辅助噬菌体拯救的方法,从TG1菌株中获得多样化的噬菌体抗体库。使用体外噬菌体库固相亲和筛选的方法,以CEA蛋白为靶点筛选获得高亲和力抗体。结果成功构建了鼠源抗CEA噬菌体ScFv免疫库,经计算库容量为1.02×10^(8) CFU,并通过筛选获得了靶向CEA的ScFv。结论利用噬菌体展示技术,筛选了靶向CEA的抗体,为该靶点抗体的筛选奠定基础。