神经肽类激素基因克隆的筛选及其在医药上的应用前景探讨

作     者：胡耀雄 罗炎基 田启昌 

作者机构：广州市医药卫生研究所 

出 版 物：《广州医药》 (Guangzhou Medical Journal)

年 卷 期：1991年第22卷第1期

页      面：1-5页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 08[工学] 

主　　题：神经肽类激素 基因克隆 POMC 

摘      要：本文重点介绍利用分子杂交技术,通过用(POMC,Pro-Opiolnelancortin)阿片肽-黑色素-肾上腺皮质激素前体的 DNA 探针从人脑的 cDNA 基因库中筛选出12个特异性基因克隆。重组 POMC 的质粒经一系列的培养、扩增、裂解、氯化铯梯度超速离心、限制性内切酶消化、低熔点琼脂糖电泳回收特异性插入的 DNA 片段(～600~bp),所得的特异性 DNA 片段经^(32)P-[dCTP]同位素的标记,制备成放射性比活7×10~8cpm 的DNA 探针;通过 DNA 杂交原理,从人脑 cDNA 文库中筛选出与 POMC 相关的12个信号基因克隆,经 X-gal 的复筛得到纯的 POMC 重组体。所得的重组体对今后神经肽类激素基因在体外复制、表达分泌具有重要意义,而且为今后利用遗传工程手段生产稀有的神经肽激素药物奠定基础。