Caveolin-1基因重组腺病毒表达系统的构建与鉴定

作     者：李二毛 沈飞 张焕玲 蔡文松 朱光辉 刘启才 徐波 Li Ermao;Shen Fei;Zhang Huanling;Cai Wensong;Zhu Guanghui;Liu Qicai;Xu Bo

作者机构：广州医科大学实验医学中心广东广州510182 广州市第一人民医院普通外科广东广州510182 

出 版 物：《广州医科大学学报》 (Academic Journal of Guangzhou Medical University)

年 卷 期：2014年第42卷第4期

页      面：9-12,18页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 

基　　金：广州市医药卫生科技重点项目(201102A212018) 王宝恩肝纤维化研究基金(20100020) 广州市卫生局中西医结合科研项目(20112A011010) 广东省科技计划项目(2009B060700019) 

主　　题：小凹蛋白-1 腺病毒 肝纤维化 大鼠肝组织 caveolin-1 

摘      要：目的:构建靶向肝脏的小凹蛋白-1 caveolin-1基因重组腺病毒并对该表达体系进行鉴定。方法:根据GeneBanks中caveolin-1的序列设计引物,以大鼠肝组织提取总RNA为模板,PCR扩增caveolin-1,并将caveolin-1序列克隆至pAdTrack-CMV质粒中,再与pAd-easy质粒进行同源重组构建重组腺病毒载体,利用脂质体法于293细胞中进行包装重组腺病毒,RT-PCR检测caveolin-1基因的转录,Westernblotting检测caveolin-1蛋白的表达情况。结果:PCR及Western blotting检测结果表明成功构建出caveolin-1基因重组腺病毒。结论:成功构建出caveolin-1基因重组腺病毒,为进一步研究caveolin-1基因在肝纤维化及肝硬化疾病中的作用机制打下实验基础。