miR-217靶向FOXO3影响非小细胞肺癌对吉非替尼耐药性及相关机制

作     者：赵论 赵欣 林晨琛 付琪 石默晗 张浩然 ZHAO Lun;ZHAO Xin;LIN Chenchen;FU Qi;SHI Mohan;ZHANG Haoran

作者机构：蚌埠医学院第一附属医院肿瘤内科安徽蚌埠233003 

出 版 物：《实用医学杂志》 (The Journal of Practical Medicine)

年 卷 期：2024年第40卷第16期

页      面：2277-2283页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：安徽省高校自然科学研究项目(编号:2023AH052000) 蚌埠医学院自然科学研究项目(编号:2021byzd041) 

主　　题：非小细胞肺癌 miR-217 FOXO3 PI3K/AKT信号通路 

摘      要：目的检测miR-217对非小细胞肺癌吉非替尼耐药性的影响,并探讨下游靶基因及相关通路。方法qRT-PCR检测人肺正常上皮细胞系BEAS-2B,NSCLC细胞系A549、HCC827、PC9、NCI-H1975及吉非替尼耐药株PC9/GR中miR-217表达量。选取PC9/GR细胞,利用转染技术构建control组、NC-mimic组、miR-217 mimic组、miR-217 mimic+si-NC组、miR-217 mimic+si-FOXO3组细胞,CCK8及克隆形成实验检测细胞增殖能力、流式细胞仪检测细胞凋亡能力,Western blot检测PI3K/AKT信号通路蛋白表达。Targetscan生物信息学网站预测miR-217下游靶基因,双荧光素酶实验检测miR-217与靶基因FOXO3相关性。结果与BEAS-2B相比,miR-217表达量在A549、HCC827、PC9、NCI-H1975细胞中显著降低(P0.05),随着吉非替尼培养浓度增加,PC9细胞中miR-217基因表达量逐渐降低(P0.05),并且miR-217在PC9/GR细胞中的表达低于PC9(P0.05)。相较于control及NC-mimic组,miR-217 mimic组细胞增殖能力明显降低(P0.05),细胞凋亡数量增多(P0.05),p-PI3K和p-AKT蛋白表达量降低(P0.05)。双荧光素酶报告表明FOXO3是miR-217的靶标。回复实验测得,与miR-217 mimic组及miR-217 mimic+si-NC组相比,miR-217 mimic+si-FOXO3组细胞耐药能力升高(P0.05),增殖能力显著提升(P0.05),细胞凋亡数量减少(P0.05),p-PI3K和p-AKT蛋白表达量增高(P0.05)。结论miR-217过表达逆转NSCLC细胞PC9/GR对吉非替尼的耐药性并抑制PC9/GR细胞增殖加速凋亡,这种机制可能与靶向FOXO3调控PI3K/AKT信号通路相关。