酵母双杂交筛选与单剪接型2．2kb乙型肝炎病毒剪接特异性新蛋白相互作用的肝细胞蛋白
Yeast two-hybrid system screening liver cell proteins interacting with the novel protein encoded by the 2. 2 kb singly spliced variant of hepatitis B virus genome作者机构：福建医科大学分子医学研究中心福建省高校感染与肿瘤重点实验室福州350004
出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)
年 卷 期：2010年第30卷第3期
页 面：228-233页
核心收录：
学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学]
基 金：基金项目:福建省科技厅青年人才创新项目(2008F3046) 福建省高等学校科技创新团队培育计划基金(FNU-RT001) 国家自然科学基金(30970163)
摘 要：目的筛选与单剪接型2．2kb乙型肝炎病毒（HBV）剪接特异性新蛋白相互作用的肝细胞蛋白。方法PCR扩增单剪接型2．2kbHBV剪接特异性新基因TPss并克隆于诱饵载体pGBKT7，在证实TPss蛋白不具有自激活作用的前提下，以酵母双杂交系统筛查与TPss蛋白相互作用的肝细胞蛋白，进而通过哺乳动物细胞双杂交实验验证候选肝细胞蛋白与TPss蛋白在Huh7和HepG2肝细胞中的相互作用。结果构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-TPss，Westernblot显示其在酵母中表达TPss蛋白。酵母双杂交筛选及哺乳动物细胞双杂交证实TPss蛋白可与4种肝细胞蛋白相互作用，即组织蛋白酶B、微粒体环氧化物水解酶、组织蛋白酶D与纤维蛋白原γ链。结论TPss可与多种肝细胞蛋白相互作用。
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