马铃薯Y病毒复制酶基因不同位置cDNA区段介导对PVY的不同抗性

作     者：徐丽 宋云枝 王文俊 朱常香 温孚江 Xu Li;Song Yunzhi;Wang Wenjun;Zhu Changxiang;Wen Fujiang

作者机构：山东农业大学植物保护学院泰安271018 山东农业大学作物生物学国家重点实验室泰安271018 山东农业大学作物生物学国家重点实验室泰安271018 山东农业大学生命科学学院泰安271018 

出 版 物：《植物保护学报》 (Journal of Plant Protection)

年 卷 期：2010年第37卷第3期

页      面：227-233页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 

基　　金：国家自然科学基金(30771408) 

主　　题：马铃薯Y病毒 复制酶基因 RNA介导的病毒抗性 

摘      要：为探究靶序列位置对RNA介导的病毒抗性产生的影响，利用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）技术扩增马铃薯Y病毒（Potato virus Y, PVY）复制酶基因（nuclear inclusion b，NIb）不同位置的cDNA区段，反向插入双元载体pROKII中，构建了发夹RNA（hairpin RNA，hpR—NA）结构的植物表达载体。将构建的植物表达载体采用冻融法转入农杆菌LBA4404，叶盘法转化烟草NC89，获得转基因植株。攻毒试验表明：PVYNIb基因不同位置cDNA区段介导的对PVY的抗性存在显著差异；3’端1／2处和中间位置的序列可介导高水平的病毒抗性，抗性植株的比例在50％以上，而5‘端、5’端1／2处和3’端的序列介导的抗性效率较低，抗性植株的比例仅为10％～30％。Northern杂交显示：抗病植株中RNA的积累量明显低于同类型的感病植株，抗性与RNA积累量呈负相关；抗病转基因植株中有siRNA存在，表明病毒抗性是由RNA介导的。