调宁蛋白T184的定点突变、表达、纯化和鉴定
Construction, Expression and Purification of Calponin T184A:a Mutant of Calponin.作者机构：同济医科大学病理生理教研室
出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)
年 卷 期：1999年第26卷第1期
页 面：35-38页
核心收录：
学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术]
基 金：国家自然科学基金
摘 要：为增强调宁蛋白对平滑肌收缩的抑制作用，用ＰＣＲ重叠延长法使调宁蛋白基因中编码第１８４位苏氨酸的ＡＣＴ突变为编码丙氨酸的ＧＣＣ，将此ＰＣＲ的突变产物装入到质粒载体ｐＡＥＤ４后，转化至Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中，构建的重组转化子用酶切和测序鉴定．诱导含有重组转化子的Ｅ．ｃｏｌｉ获得高效表达，经ＳＤＳＰＡＧＥ和蛋白质印迹鉴定后，采用反复冻融法及葡聚糖凝胶层析柱分离，初步纯化出调宁蛋白突变体Ｔ１８４Ａ．
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