骨植入材料表面微结构对MC3T3-E1成骨细胞成骨分化的影响

作     者：黄丽苹 李卉 王新革 王瑞 常蓓 李适廷 兰小蓉 李广文 Huang Liping;Li Hui;Wang Xinge;Wang Rui;Chang Bei;Li Shiting;Lan Xiaorong;Li Guangwen

作者机构：西南医科大学附属口腔医院种植科口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川省泸州市646000 西南医科大学公共卫生学院流行病与统计教研室四川省泸州市646000 军事口腔医学国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心陕西省口腔医学重点实验室第四军医大学口腔医院修复科陕西省西安市710032 空军军医大学唐都医院军队人员医疗保健中心陕西省西安市710032 火箭军特色医学中心口腔科北京市100088 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2025年第29卷第10期

页      面：1990-1996页

学科分类：1003[医学-口腔医学] 1002[医学-临床医学] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 080501[工学-材料物理与化学] 0805[工学-材料科学与工程（可授工学、理学学位）] 080502[工学-材料学] 100302[医学-口腔临床医学] 100215[医学-康复医学与理疗学] 10[医学] 

基　　金：四川省科技厅重点研发项目(22YFS0634),项目负责人:兰小蓉 泸州市科技局重点研发计划(面上)(2022-SYF-33),项目负责人:李广文 西南医科大学自科重点项目(2022ZD015),项目负责人:李广文 西南医科大学附属口腔医院院级重点项目(2022Z01),项目负责人:李广文 

主　　题：骨植入材料 钛种植体 材料微结构 机械敏感通道蛋白 成骨分化 PIEZO1 

摘      要：背景:骨植入材料表面微纳结构仿生设计可模拟人体天然骨组织中细胞外环境的结构,从而获得较为理想的骨整合功能,但骨植入材料表面微纳结构调控细胞功能及促进成骨的机制还有待进一研究。目的:分析钛片材料微结构表面对MC3T3-E1成骨细胞成骨分化的影响。方法:(1)在5 V或20 V恒定电压下,采用酸蚀和阳极氧化技术在钛片表面制备不同管径的纳米管阵列,分别记为R5组、R20组。检测纯钛片(未经酸蚀和阳极氧化处理)、R5组、R20组的表面形貌、粗糙度与亲水性。(2)将对数生长期的MC3T3-E1成骨细胞分别接种于纯钛片、R5组、R20组钛片表面,成骨诱导培养24 h后,采用RT-PCR检测与免疫荧光染色分析细胞机械敏感通道蛋白1的表达;加入含或不含机械敏感通道蛋白1激活剂Yada1的成骨诱导基,培养7 d后进行碱性磷酸酶染色,培养14 d后进行茜素红染色。结果与结论:(1)扫描电镜下可见纯钛片表面光滑,R5组、R20组钛片表面可见分布相对均匀且有序的纳米管阵列,平均直径分别约30 nm和100 nm,原子力显微镜进一步验证了扫描电镜观察结果。R5组钛片表面粗糙度大于纯钛片(P 0.05),水接触角小于纯钛片(P 0.05);R20组钛片表面粗糙度大于R5组(P0.05),水接触角小于R5组(P0.05)。(2)RT-PCR检测与免疫荧光染色显示,R5组细胞机械敏感通道蛋白1的表达高于纯钛片组(P 0.05),R20组细胞机械敏感通道蛋白1的表达高于R5组(P 0.05)。在成骨诱导条件下,与未加入Yada1情况相比,纯钛片组加入Yada1后的细胞碱性磷酸酶活性、钙化结节沉积均无明显变化,R5组、R20组加入Yada1后的细胞碱性磷酸酶活性、钙化结节沉积均显著增加(P 0.05);在加入或未加入Yada1情况下,R5组细胞碱性磷酸酶活性与钙化结节沉积均多于纯钛片组(P 0.05),R20组细胞碱性磷酸酶活性与钙化结节沉积均多于R5组(P 0.05)。(3)结果表明,钛片表面微结构可通过激活机械敏感通道蛋白1促进成骨细胞MC3T3-E1的成骨分化。