miR-30a-5p靶向JAK1调控人胃腺癌AGS细胞自噬的机制研究

作     者：刘海英 曹天柱 崔自重 Liu Haiying;Cao Tianzhu;Cui Zizhong

作者机构：长沙市第三医院介入血管科普通外科二十四病室血液肿瘤科湖南长沙410015 

出 版 物：《四川医学》 (Sichuan Medical Journal)

年 卷 期：2024年第45卷第7期

页      面：709-715页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：长沙市自然科学基金(编号:kq2202014) 

主　　题：胃腺癌 miR-30a-5p JAK1 AGS细胞 细胞自噬 

摘      要：目的探究miR-30a-5p靶向JAK1调控人胃腺癌AGS细胞自噬的机制。方法体外培养人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和胃腺癌细胞(AGS)。RT-qPCR检测miR-30a-5p表达水平,Starbase数据库预测miR-30a-5p的表达水平及其与JAK1的潜在结合位点,双荧光素酶报告实验验证miR-30a-5p对JAK1基因的靶向调控作用,免疫荧光检测自噬标志物LC3阳性细胞水平,WB检测JAK1和自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3 Ⅱ/Ⅰ和p62)的表达水平。结果与GES-1组相比,AGS组细胞中miR-30a-5p表达水平显著降低;过表达miR-30a-5p后,AGS细胞中自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3 Ⅱ/Ⅰ)表达水平以及自噬标志物LC3阳性细胞水平显著降低,p62蛋白的表达水平显著升高;miR-30a-5p与JAK1存在结合位点且靶向负调控JAK1;与miR-30a-5p过表达+oe-NC对照处理,miR-30a-5p过表达同时过表达JAK1处理后观察到AGS细胞中自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ的蛋白表达水平明显增加,p62蛋白水平明显降低,进一步的免疫荧光也观察到miR-30a-5p过表达+过表达JAK1后LC3荧光强度明显增加。结论miR-30a-5p靶向负调控JAK1蛋白的表达,抑制人胃腺癌AGS细胞自噬。