利用TAIL-PCR克隆耐盐基因及其分析

作     者：张伟涛 程国军 周俊初 Zhang Weitao;Cheng Guojun;Zhou Junchu

作者机构：中南林业科技大学生物环境科学与技术研究所长沙410004 华中农业大学农业微生物国家重点实验室武汉430070 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2010年第26卷第11期

页      面：166-170,176页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家"973"项目(001CB1089) 国家微生物资源平台建设项目(2005DKA21208-6) 

主　　题：筛选 耐盐根瘤菌 TAIL-PCR 耐盐基因 

摘      要：通过大量筛选得到一株高耐盐的豇豆根瘤菌WME7,最高可耐15g/L NaCl,利用Tn5-sacB转座子对该菌株进行随机插入突变,从突变子中筛选获得30个共生缺陷型突变株。利用TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)方法克隆了突变株Tn5-sacB侧翼序列,通过BLAST发现有1个突变株的插入失活基因与鼠伤寒沙门氏菌抗银的结合蛋白SilE有94%同源性,表明有关Na+离子的抗性基因可能与Ag+离子的抗性基因有某种关系。该基因在其它菌中也能抗其它金属离子(铜、锌、钴、铬)。