骨灵膏通过抑制软骨细胞凋亡促进关节软骨缺损模型骨组织再生的研究

作     者：胡珂琦 干开丰 张挺 夏臣杰 周珂 沈延东 

作者机构：宁波市医疗中心李惠利医院骨科 

出 版 物：《中华中医药学刊》 (Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2024年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：浙江省自然科学基金(LQ21H060002) 宁波市医疗卫生高端团队重大攻坚项目(No.2022020102) 宁波市自然科学基金(2022J251) 

主　　题：骨灵膏 软骨细胞 凋亡 膝骨性关节炎 软骨缺损 

摘      要：目的：探讨骨灵膏对兔膝关节软骨缺损模型骨组织再生的作用，及对软骨细胞凋亡的影响。方法：30只雄性新西兰兔，随机分为空白对照组、模型组以及骨灵膏低、中、高剂量组，每组 6只。采用改良型关节刻痕法建立膝关节软骨缺损模型，空白对照组未钻孔，骨灵膏低、中、高剂量组灌胃给予1.16mL/kg（3.70g/kg生药量）、3.47mL/kg（11.10g/kg生药量）、10.41mL/kg（33.31g/kg生药量），空白对照组、模型组给予3.47mL/kg生理盐水，1次/3天，连续给药12周。采用Wakitani评分标准进行组织学评分，采用Masson染色法进行病理学评估，采用缺口末端标记（terminal transferase-mediated dUTP nick end labeling，TUNEL）法检测滑膜、软骨细胞凋亡情况，采用酶联免疫吸附法检测尿液里面的吡啶酚（pyridinophenol，PYD）以及关节液里面的一氧化氮（nitric oxide，NO）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、过氧化脂质（lipid peroxide，LPO）浓度水平。结果：模型组给药后第12周伤口处凹凸不平，填平不同的剂量组软骨缺损区，这里面低剂量组的表面粗糙，中剂量组表明欠光滑，高剂量组表面较光滑，关节软骨结构良好。与模型组相比，各剂量组软骨细胞排列较为规律，软骨细胞分泌的胶原纤维较多。低、中、高剂量组的兔膝关节软骨缺损处组织形态学评分以及滑膜、软骨细胞凋亡率高于对照组，低于模型组，随着剂量增加，组织形态学评分以及滑膜、软骨细胞凋亡率均呈降低趋势（P0.05）。低、中、高剂量组的关节液NO、LPO以及尿液PYD水平高于对照组，低于模型组，随着剂量的上涨，表达水平方面则呈下降的趋势，差异明显（P0.05）；低、中、高剂量组的关节液SOD水平低于对照组，高于模型组，随着剂量的上涨，表达水平方面则呈上升的趋势，差异明显（P0.05）。结论：骨灵膏可改善膝关节软骨缺损模型兔的软骨损伤情况，加快软骨组织修复，其作用机制可能为通过调控氧化应激因子表达而抑制软骨细胞凋亡，以及促进软骨组织再生。