基于PGAM5-Drp1轴探讨温肺降浊方对Aβ诱导BV-2细胞线粒体功能的影响

作     者：张鼎 胡芷涵 周珂青 陈炜 秦红玲 向军军 胡跃强 

作者机构：广西中医药大学研究生院 上海中医药大学中药学院 广西中医药大学第一附属医院 

出 版 物：《中成药》 (Chinese Traditional Patent Medicine)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82260904) 国家中医药管理局高水平重点学科(ZYYZDXK-2023166) 广西中医脑病临床研究中心项目(桂科AD20238028) 广西中医药重点学科建设项目(GZXK-Z-20-13) 广西中医药大学“歧黄工程”高层次人才团队(202410) 广西中医药大学博士研究生创新项目(YCBXJ2023010) 

主　　题：温肺降浊方 阿尔茨海默病(AD) Aβ PGAM-Drp1轴 线粒体稳态平衡 BV-2细胞 

摘      要：目的探讨温肺降浊方对Aβ25-35诱导BV-2细胞线粒体功能的影响。方法通过Aβ25-35诱导BV-2细胞建立阿尔茨海默病（AD）细胞模型，确定Aβ25-35干预的最佳浓度和时间点，设置LFHP-1c组（抑制剂）和温肺降浊方含药血清组。CCK-8法检测最佳干预浓度和时间点，Transwell实验观察细胞迁移情况，Hoechst33342染色观察细胞凋亡情况，免疫荧光法检测PGAM5、Drp1的阳性细胞数表达情况，RT-qPCR法和Westernblot法检测细胞PGAM5、Drp1、OPA1、Mfn1/2mRNA和蛋白表达。结果以终浓度5μmol/L的Aβ25-35干预48h为制备AD细胞模型的最佳条件，20%温肺降浊方含药血清干预48h细胞活性最佳。与对照组比较，模型组细胞迁移数量减少，存在较多亮蓝色阳性凋亡细胞，PGAM5、Drp1阳性细胞数、mRNA和蛋白表达升高（P0.05），OPA1、Mfn1/2mRNA和蛋白表达降低（P0.05）；与模型组比较，各给药组细胞迁移数量增加，亮蓝色阳性凋亡细胞减少，PGAM5、Drp1阳性细胞数、mRNA和蛋白表达降低（P0.05），OPA1、Mfn1/2mRNA和蛋白表达升高（P0.05）。结论温肺降浊方可以调控PGAM5-Drp1轴减轻BV-2模型细胞损伤，改善线粒体稳态平衡，从而提高认知水平，发挥脑保护效应。