流体剪应力对人脐静脉内皮细胞葡萄糖调节蛋白78和C/EBP同源蛋白表达的影响

作     者：张森 王先伟 黄家明 张昊然 李梅 陈东 Zhang Sen;Wang Xianwei;Huang Jiaming;Zhang Haoran;Li Mei;Chen Dong

作者机构：大连医科大学研究生院116044 大连理工大学附属中心医院(大连市中心医院)神经外科 

出 版 物：《中国脑血管病杂志》 (Chinese Journal of Cerebrovascular Diseases)

年 卷 期：2024年第21卷第6期

页      面：388-395页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

基　　金：大连市生命健康领域指导计划项目(2023YGZD01) 大连市中心医院“登峰计划”院内科研自主立项项目(2023ZZ039) 

主　　题：血流动力学 人脐静脉内皮细胞 内质网应激 流体剪应力 葡萄糖调节蛋白78 C/EBP同源蛋白 

摘      要：目的探索流体剪应力对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)表达的影响。方法以HUVECs作为实验细胞,设计并构建流体动力学模拟实验系统,控制流体动力学模拟实验系统中灌流液的流速,以实现对实验细胞施加不同的流体剪应力。按实验细胞在实验系统中所承受的不同流体剪应力,将实验细胞分为低剪应力组(A组;0.4 Pa)、中剪应力组(B组;0.8 Pa)和高剪应力组(C组;1.2 Pa)。每组HUVECs包含3个细胞玻片,每个玻片经实验系统灌流液反复循环流经12 h。采用蛋白质印迹法对各组细胞中GRP78和CHOP蛋白水平进行检测,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术测定各组细胞GRP78和CHOP蛋白及其信使RNA(mRNA)相对水平。应用GraphPad Prism 8.0软件对数据进行统计学分析。结果(1)A、B、C组HUVECs中GRP78蛋白相对表达水平分别为1.33±0.46、0.93±0.34、0.64±0.30;多组间比较差异有统计学意义(F=36.17,P0.05)。A组GRP78蛋白相对表达水平高于B组、C组(均P0.01),B组GRP78蛋白相对表达水平高于C组(P=0.0013)。3组HUVECs中CHOP蛋白相对表达水平分别为:A组1.29±0.38,B组0.90±0.34,C组0.59±0.29;多组间比较差异有统计学意义(F=41.27,P0.05)。A组CHOP蛋白相对表达水平高于B组、C组(均P0.01),B组CHOP蛋白相对表达水平高于C组(P=0.0004)。(2)A、B、C组HUVECs中GRP78 mRNA相对表达水平分别为18.3±3.4、11.3±1.8、5.4±2.2;多组间比较差异有统计学意义(F=189.20,P0.05)。A组GRP78 mRNA相对表达水平高于B组、C组(均P0.01),B组GRP78 mRNA相对表达水平高于C组(P0.01)。3组HUVECs中CHOP mRNA相对表达水平分别为:A组20.4±3.8,B组14.2±2.1,C组7.8±1.3;多组间比较差异有统计学意义(F=171.80,P0.05)。A组CHOP mRNA相对表达水平高于B组、C组(均P0.01),B组CHOP mRNA相对表达水平高于C组(P0.01)。结论低流体剪应力可能增加HUVECs中GRP78、CHOP的蛋白及其mRNA表达水平。