芬苯达唑通过激活自噬抑制肺腺癌细胞增殖及侵袭、迁移能力

作     者：黄子祺 李彦奇 戴纪刚 郑鸿 HUANG Ziqi;LI Yanqi;DAI Jigang;ZHENG Hong

作者机构：陆军军医大学第二附属医院胸外科重庆400037 

出 版 物：《现代药物与临床》 (Drugs & Clinic)

年 卷 期：2024年第39卷第7期

页      面：1671-1680页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81972190) 陆军军医大学第二附属医院青年博士人才孵化计划(2022YQB012) 

主　　题：芬苯达唑 肺腺癌 自噬 增殖 侵袭 迁移 

摘      要：目的 探究芬苯达唑对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响以及自噬与迁移、侵袭的关系。方法 将人肺腺癌A549、H358细胞分为对照组及芬苯达唑(1、2.5、5、10、20μmol/L)组。用CCK-8法及细胞计数法检测细胞增殖水平,用划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,通过RT-qPCR及蛋白免疫印迹法检测上皮–间充质转化(EMT)相关蛋白的m RNA及蛋白表达水平,通过转录组测序并分析自噬相关基因及其表达量。用自噬抑制剂氯喹(5、10μmol/L)与芬苯达唑(5μmol/L)处理细胞后再通过划痕及Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力。结果 与对照组相比,芬苯达唑各浓度处理组能显著抑制A549和H358细胞活性及迁移、侵袭能力(P0.05、0.01、0.001);随着芬苯达唑药物浓度增加,N-钙黏蛋白(N-cadherin)、细胞角蛋白(Cytokeratin)、纤维连接蛋白(FN1)m RNA相对表达逐渐下降(P0.05、0.01、0.001);紧密连接蛋白(Occludin)、波形蛋白(Vimentin)m RNA表达水平在低浓度时较高,随着芬苯达唑药物浓度增加Occludin、Vimentin m RNA表达水平降低(P0.05、0.01、0.001)。与对照组相比,随着芬苯达唑药物浓度增加,N-cadherin、Cytokeratin、FN1、Occludin蛋白相对表达量显著降低,而Vimentin蛋白相对表达水平随药物浓度降低而增高(P0.05、0.01、0.001)。基因差异热图显示,芬苯达唑处理后自噬相关基因(MAP1LC3B、ATG5、ULK3、Bax、ATG16L1)表达量增高,芬苯达唑的浓度增加使自噬相关蛋白重组人自噬效应蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白轻链3(LC3)-II/LC3-I相对蛋白表达量升高,选择性自噬接头蛋白P62表达量明显降低(P0.05、0.01、0.001)。在使用了氯喹阻断自噬后,可以逆转芬苯达唑引起的细胞增殖、迁移及侵袭(P0.05、0.01、0.001)抑制作用。结论 芬苯达唑可以通过促进自噬从而抑制了肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。