氢醌对A549细胞人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶基因mRNA表达的影响

作     者：舒亚 柯跃斌 王玲 张遵真 SHU Ya;KE Yue-bin;WANG Ling;ZHANG Zun-zhen

作者机构：四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室成都610041 深圳市疾病预防控制中心 

出 版 物：《中华预防医学杂志》 (Chinese Journal of Preventive Medicine)

年 卷 期：2009年第43卷第5期

页      面：428-433页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金（30571535） 

主　　题：氢醌类 丙二醛 逆转录聚合酶链反应 

摘      要：目的观察不同浓度氢醌（hydroquinone，HQ）对人肺腺癌A549细胞活性氧（reactiveoxygen species，ROS）、脂质过氧化损伤产物丙二醛（malonaldehyde，MDA）、抗氧化酶活性以及氧化损伤修复酶人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶（human8-oxo—guanine DNA glycoslase，hOGG1）基因mRNA表达的影响，探讨HQ毒作用的分子机制。方法不同浓度HQ作用于A549细胞，噻唑兰（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）法测定细胞存活率，荧光探针检测细胞内ROS的变化，比色法测定MDA含量和过氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）及谷胱甘肽过氧物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活力，逆转录聚合酶链反应（reverse transcription—polymerase chain reaction，RT-PCR）技术分析hOGG1基因mRNA的表达。结果随着HQ浓度的增加，各实验结果为：（1）A549细胞的吸光度值（A值）下降，160μmol／L和320μmol／L浓度组[（0．584±0．098）、（0．328±0．066）]与对照组（0．989±0．150）相比差异有统计学意义（q值分别为5．56、9．07，P值均〈0．05），且两组细胞存活率均低于80％；（2）A549细胞内ROS生成增多，40μmol／L和80μmol／L浓度组A值[（39．80±4．15）、（101．99±9．45）]与对照组（5．71±0．50）相比差异有统计学意义（q值分别为10．74、30．32，P值均〈0．05）；（3）SOD、GSH-Px活性下降，活性值在80μmol／L时[（22．93±0．56）U／mg prot、（25．60±2．31）U／mg prot]均低于对照组[（25．62±0．28）U／mg prot、（38．97±2．61）U／mg prot]，差异有统计学意义（q值分别为12．17、8．78，P值均〈0．05）；MDA含量升高，在40μmoL／L和80μmol／L[（1．07±0．01）nmol/mg prot、（1．19±0．08）nmol/mg prot]时高于对照组[（0．77±0．04）nmol/mg prot]，差异有统计学意义（q值分别为10．90、15．49，P值均〈0．05）；SOD（r=-0．95，F=20．00，P=0．04）与GSH-Px（r=-0．99，F=115．48，P=0．01）活力的下降和MDA（r=0．96，F=21．31，P=0．04）含量的升高均与HQ浓度的变化具有剂量-反应关系；（4）RT-PCR结果显示：HQ作用后，A549细胞hOGG1mRNA的表达呈下降趋势，80μmoL／L浓度组hOGG1mRNA的表达（0．478±0．017）与对照组（0．715±0．038）相比降低较明显（q=11．70，P〈0．05）。结论HQ可以诱导细胞活性氧增加和hOGG1基因mRNA表达水平下降，提示氧化损伤是HQ毒作用的重要机制。