红豆越橘组培苗茎尖小滴玻璃化超低温保存

作     者：杨晶文 毛宇金 李娴 张志东 孙海悦 李亚东 刘海广 YANG Jingwen;MAO Yujin;LI Xian;ZHANG Zhidong;SUN Haiyue;LI Yadong;LIU Haiguang

作者机构：吉林农业大学园艺学院长春130118 吉林省小浆果遗传育种与创新利用工程中心长春130118 

出 版 物：《吉林农业大学学报》 (Journal of Jilin Agricultural University)

年 卷 期：2024年第46卷第3期

页      面：439-445页

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

基　　金：吉林省科技发展计划项目(20170414023GH 20180201076NY) 

主　　题：红豆越橘 超低温保存 小滴玻璃化 组培苗茎尖 

摘      要：研究了红豆越橘组培苗茎尖的小滴玻璃化超低温保存方法。剪取苗龄30 d的组培苗带顶芽茎段,在WPM(Woody plant medium)+0.5 mg/L ZT(Zeatin玉米素)+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂培养基(SSM)上,于4℃黑暗条件下炼苗25 d;将剥取的长约2.0 mm茎尖在黑暗和(25±2)℃条件下用预培养基(WPM+0.3 mol/L蔗糖+7 g/L琼脂)培养24 h;室温下茎尖在加载液(WPM+2.0 mol/L甘油+1.0 mol/L蔗糖)中处理30 min;0℃下用植物玻璃化溶液Ⅱ(PVS2)处理茎尖40 min;0℃下在铝箔条上将茎尖与PVS2制成小滴(2.5μL),并迅速投入液氮(-196℃)中保存1 h;从液氮中取出带茎尖的铝箔条迅速转入卸载液(WPM+1.2 mol/L蔗糖)中,室温下解冻和卸载20 min;将卸载的茎尖在SSM培养基上黑暗培养(25±2)℃1 d;之后在正常光照条件下再生培养。结果表明:再生培养30 d后,试验的4份种质资源的平均再生率为76%,这为红豆越橘种质资源保存提供了一种新的途径。