柱前衍生-高效液相色谱法检测魔芋飞粉中的神经酰胺

作     者：张新月 李玖江 李玥 陈尚卫 朱松 ZHANG Xinyue;LI Jiujiang;LI Yue;CHEN Shangwei;ZHU Song

作者机构：江南大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室江苏无锡214122 四川晗晨生物科技有限公司四川眉山620036 江南大学食品学院江苏无锡214122 

出 版 物：《分析科学学报》 (Journal of Analytical Science)

年 卷 期：2024年第40卷第3期

页      面：309-314页

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(No.32172197) 

主　　题：神经酰胺 脱酰基 在线衍生 高效液相色谱 9-氯甲酸芴甲酯 

摘      要：建立了一种柱前衍生-高效液相色谱测定魔芋飞粉中神经酰胺的方法。将神经酰胺与氢氧化钾乙醇溶液在高温条件下进行脱酰基反应,再与9-氯甲酸芴甲酯(FMOC-Cl)衍生化试剂反应,高效液相色谱分离后,采用紫外或荧光检测器检测。考察并确定了脱酰基以及衍生化反应的最佳条件,在110℃条件下用0.5 mol/L氢氧化钾乙醇溶液对神经酰胺标品或样品处理1.5 h,然后用10 mg/mL的FOMC-Cl对其进行在线衍生。采用Waters Symmetry C18柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)分离,甲醇/水/磷酸(体积比10/90/0.05)-甲醇为流动相进行梯度洗脱,荧光检测器的激发波长和吸收波长分别为266 nm和305 nm;紫外检测器波长为262 nm。在神经酰胺浓度为20~500μg/mL范围内方法的线性关系良好,其中紫外检测器检测的相关系数(R^(2))为0.9978,荧光检测器检测的R2为0.9978,回收率为97.3%~103.6%,相对标准偏差1.64%。所建立方法采用紫外和荧光检测器测定目标物的检测限分别为0.48μg/mL和0.0082μg/mL,定量限分别为1.6μg/mL和0.027μg/mL。