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干扰circABCC4靶向微小RNA-185-5p抑制胰腺癌细胞发生发展

Interfering with circABCC4 targeting microRNA-185-5p to inhibit the development of pancreatic cancer cells

作     者:于龙 张少康 李超博 高志强 Yu Long;Zhang Shaokang;Li Chaobo;Gao Zhiqiang

作者机构:郑州大学第一附属医院肝胆胰外科河南省消化器官移植重点实验室郑州450052 

出 版 物:《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期:2024年第41卷第6期

页      面:1213-1217页

学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基  金:河南省医学科技攻关计划项目(LHGJ20220706) 

主  题:胰腺癌 微小RNA 增殖 凋亡 迁移 侵袭 

摘      要:目的探讨circABCC4对胰腺癌细胞发生发展的影响及分子机制。方法收集2020年10月至2023年10月郑州大学第一附属医院收治的39例胰腺癌患者的癌组织及癌旁组织,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circABCC4和微小RNA(miR)-185-5p的表达水平;双荧光素酶报告实验检测circABCC4和miR-185-5p的靶向关系。将胰腺癌细胞SW1990分为si-circABCC4组、si-NC组、miR-185-5p mimic组、miR-NC组、si-circABCC4+miR-185-5p inhibitor组、si-circABCC4+抗miR-NC组;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖抑制率;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测蛋白表达;Transwell检测细胞迁移和侵袭数。两组比较行t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果胰腺癌组织中circABCC4表达水平高于癌旁组织(3.13±0.29比1.03±0.11,t=42.283,P0.05),miR-185-5p表达水平低于癌旁组织(0.45±0.08比1.09±0.17,t=21.273,P0.05)。circABCC4靶向结合并负调控miR-185-5p表达(P0.05)。si-circABCC4组SW1990细胞抑制率[(47.13±2.23)%比0,F=2376.899,P0.05]、凋亡率[(18.94±1.08)%比(7.33±0.72)%,F=409.972,P0.05和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关的x蛋白(bax)表达水平(0.55±0.04比0.21±0.03,F=310.551,P0.05)]高于si-NC组,克隆形成数[(67.44±3.44)个比(112.00±5.94)个,F=296.029,P0.05]、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)表达水平(0.27±0.03比0.67±0.05,F=236.571,P0.05)低于si-NC组。miR-185-5p mimic组SW1990细胞抑制率[(55.52±2.30)%比(0.02±0.01)%,F=2376.899,P0.05]、凋亡率[(22.59±1.45)%比(7.11±0.55)%,F=409.972,P0.05]和bax表达水平(0.65±0.04比0.20±0.02,F=310.551,P0.05)高于miR-NC组,克隆形成数[(54.11±2.23)个比(112.11±6.15)个,F=296.029,P0.05]、bcl-2表达水平(0.17±0.02比0.67±0.07,F=236.571,P0.05)低于miR-NC组;si-circABCC4+miR-185-5p inhibitor组SW1990细胞抑制率[(19.13±0.99)%比(47.09±1.73)%,F=2376.899,P0.05]、凋亡率[(10.25±0.57)%比(18.78±1.25)%,F=409.972,P0.05]和bax表达水平(0.29±0.03比0.57±0.04,F=310.551,P0.05)低于si-circABCC4+抗miR-NC组,克隆形成数[(96.67±4.45)个比(65.78±2.86)个,F=296.029,P0.05]、bcl-2表达水平(0.52±0.04比0.26±0.03,F=236.571,P0.05)高于si-circABCC4+抗miR-NC组。si-circABCC4组SW1990细胞迁移[(97.44±3.65)个比(182.56±10.12)个,F=576.998,P0.05]和侵袭数[(85.56±3.56)个比(150.56±6.50)个,F=480.065,P0.05]低于si-NC组;miR-185-5p mimic组SW1990细胞迁移[(74.78±3.22)个比(185.56±7.21)个,F=576.998,P0.05]和侵袭数[(71.89±4.18)个比(149.67±6.02)个,F=480.065,P0.05]低于miR-NC组;si-circABCC4+miR-185-5p inhibitor组SW1990细胞迁移[(158.67±6.15)个比(98.11±2.00)个,F=576.998,P0.05]和侵袭数[(137.89±5.32)个比(85.00±3.40)个,F=480.065,P0.05]高于si-circABCC4+抗miR-NC组。结论干扰circABCC4通过上调miR-185-5p抑制胰腺癌细胞的发生发展。

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