长链非编码RNA OIP5-AS1在肾癌细胞中的表达及其与细胞增殖和转移的关系

作     者：杨栋 赵鹏程 田沛 马彦 何朝红 Yang Dong;Zhao Pengcheng;Tian Pei;Ma Yan;He Chaohong

作者机构：郑州大学附属肿瘤医院泌尿外科郑州450008 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2024年第41卷第6期

页      面：1148-1151页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：河南省医学科技攻关计划项目(LHGJ20220192) 

主　　题：长链非编码RNA 肾癌细胞 增殖 转移 

摘      要：目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)OIP5-AS1在肾癌细胞中的表达及其与细胞增殖和转移的关系。方法人肾小管上皮细胞系(HK2)和肾癌细胞系ACHN采用转录组学分析肾小管细胞和肾癌细胞差异表达lncRNA。选择表达差异最为显著的lncRNA作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析正常肾上皮细胞和肾癌细胞系(ACHN、GRC-1和786-0)lncRNA OIP5-AS1表达水平。肾癌细胞系ACHN分为lncRNA对照组和lncRNA OIP5-AS1 KD组,采用慢病毒建立稳定转染细胞系,细胞计数试剂盒(CCK-8)和肿瘤形成实验分析两组细胞的增殖能力;流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期变化;Transwell分析两组细胞的迁移和侵袭能力;蛋白质免疫印迹分析两组细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化相关蛋白表达水平。组间计量数据比较采用t检验。结果转录组学发现表达最为差异的基因是lncRNA OIP5-AS1。人肾小管上皮细胞系(HK2)lncRNA OIP5-AS1表达水平(0.97±0.13)明显低于肾癌细胞系ACHN、GRC-1和786-0(2.12±0.16、1.68±0.12、1.46±0.11),差异有统计学意义(t=13.870、9.791、7.125,P0.05)。lncRNA对照组细胞吸光度值、裸鼠体内肿瘤体积和质量[1.99±0.10、(754.50±71.61)cm^(3)、(4.96±0.87)g]明显高于lncRNA OIP5-AS1 KD组细胞[1.55±0.12、(419.17±87.59)cm^(3)、(2.96±0.27)g],差异有统计学意义(t=6.934、5.384、7.260,P0.05)。lncRNA对照组迁移和侵袭细胞数量[(145.00±9.75)、(89.17±5.38)个]明显高于lncRNA OIP5-AS1 KD组细胞[(110.67±11.52)、(63.17±10.61)个],差异有统计学意义(t=5.571、5.353,P0.05)。lncRNA对照组细胞核增殖抗原(Ki-67)、黏着斑激酶(FAK)、间充质细胞标志物神经钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平(1.02±0.11、1.44±0.16、1.21±0.17、1.44±0.16)明显高于lncRNA OIP5-AS1 KD组细胞(0.50±0.09、0.91±0.09、0.67±0.17、0.69±0.09),差异有统计学意义(t=8.755、7.117、6.509、10.100,P0.05)。lncRNA对照组上皮细胞标志物上皮钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平(1.16±0.12)明显低于lncRNA OIP5-AS1 KD组细胞(1.78±0.17),差异有统计学意义(t=7.428,P0.05)。lncRNA OIP5-AS1对细胞周期的影响:lncRNA对照组细胞G_(0)/G_(1)期[(59.17±4.02)%]明显低于lncRNA OIP5-AS1 KD组细胞[(75.17±5.91)%],差异有统计学意义(t=5.481,P0.05)。lncRNA对照组细胞S期[(32.83±5.98)%]明显高于lncRNA OIP5-AS1 KD组细胞[(24.50±2.43)%],差异有统计学意义(t=3.162,P0.05)。结论lncRNA OIP5-AS1在肾癌细胞中高表达,参与肾癌细胞的增殖和转移等细胞生物学行为。