阿奇霉素对脂多糖诱导肺泡上皮细胞炎症损伤的作用及机制研究

作     者：温玲 李宝琪 赵艳敏 郑舒扬 苏颖 WEN Ling;LI Baoqi;ZHAO Yanmin;ZHENG Shuyang;SU Ying

作者机构：秦皇岛市第一医院儿科ICU秦皇岛066000 秦皇岛市第一医院药学部秦皇岛066000 

出 版 物：《激光生物学报》 (Acta Laser Biology Sinica)

年 卷 期：2024年第33卷第3期

页      面：267-274页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 1002[医学-临床医学] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：2023年秦皇岛市科学技术研究与发展计划项目(202301A102) 

主　　题：阿奇霉素 Janus激酶2 信号转导和转录启动因子3 肺泡上皮细胞 炎症性肺损伤 

摘      要：为了探究阿奇霉素对脂多糖(LPS)诱导的人肺泡上皮细胞增殖、凋亡及Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录启动因子3(STAT3)通路的调控作用,体外培养人肺泡上皮细胞A549,分为空白组(不做干预)、LPS组(10μg/m L LPS处理24 h)、低/中/高浓度试验组(10μg/mL LPS+1、2、4μg/mL阿奇霉素)、阿奇霉素组(10μg/mL LPS+4μg/mL阿奇霉素)、抑制剂组(10μg/mL LPS+50μmol/L JAK2/STAT3通路抑制剂AG490)、阿奇霉素+抑制剂组(10μg/mL LPS+4μg/m L阿奇霉素+50μmol/L AG490)、阿奇霉素+激活剂组(10μg/m L LPS+4μg/m L阿奇霉素+0.5μmol/L JAK2/STAT3通路激活剂Colivelin)。干预24 h后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、Hoechst 33258染色法、蛋白免疫印迹法检测炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平、细胞活力、增殖率、凋亡率、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞周期素D1(Cyclin D1)及JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达水平。结果显示:LPS组细胞炎症因子IL-6、IL-8和TNF-α表达水平高于空白组,细胞活力低于空白组;与LPS组相比,高浓度试验组炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α表达水平显著降低,细胞活力显著升高。选择在LPS组基础上有差异的4μg/m L阿奇霉素作为阿奇霉素组进行后续试验。LPS组细胞增殖率、Cyclin D1蛋白表达水平低于空白组,细胞凋亡率、Caspase-3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平高于空白组。阿奇霉素组和抑制剂组显著扭转了LPS组上述指标的变化。与阿奇霉素组相比,阿奇霉素+抑制剂组细胞增殖率、Cyclin D1蛋白表达水平进一步显著升高,细胞凋亡率、IL-6、IL-8、TNF-α、Caspase-3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平进一步显著降低,阿奇霉素+激活剂组则显著逆转了上述指标的变化。本研究表明,阿奇霉素可通过抑制JAK2/STAT3信号通路减轻LPS诱导的A549细胞炎症损伤,促进细胞增殖并抑制凋亡。