芪地糖肾方对糖尿病肾病足细胞焦亡及MAPK14/RELA/Caspase-8信号通路的影响

作     者：高飞 于博睿 谢惠迪 周盈 史扬 张先慧 柳红芳 GAO Fei;YU Borui;XIE Huidi;ZHOU Ying;SHI Yang;ZHANG Xianhui;LIU Hongfang

作者机构：北京市朝阳区中医医院北京100020 北京中医药大学东直门医院北京100700 中国人民解放军总医院北京100853 北京市普仁医院北京100062 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2024年第30卷第13期

页      面：67-75页

核心收录：

学科分类：100504[医学-方剂学] 1005[医学-中医学] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 100501[医学-中医基础理论] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81774273) 北京市自然科学基金项目(7212180) 2022年东直门医院科技创新项目(DZMKJCX-2022-003) 2023年东直门医院科技创新项目(DZMKJCX-2023-005) 北京中医药大学“揭榜挂帅”项目(2023-JYBJBZD-023) 

主　　题：芪地糖肾方 糖尿病肾病 足细胞损伤 焦亡 分子机制 

摘      要：目的:探讨芪地糖肾方(QDTS)调控糖尿病肾病(DN)足细胞焦亡的分子机制。方法:体内实验将db/db小鼠分为模型组、芪地糖肾方(3.34 g·kg^(-1))和缬沙坦胶囊(10.29 mg·kg^(-1))组,db/m小鼠作为正常组,每组8只,连续干预8周。末次给药后处死小鼠,观察小鼠肾脏病理变化及焦亡活性指标NOD样受体蛋白3(NLRP3)、Gasdermin D蛋白(GSDMD)和白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达水平。体外实验将小鼠足细胞分为正常糖组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖),高糖组(35 mmol·L^(-1)葡萄糖),二甲基亚砜(DMSO)组(35 mmol·L^(-1)葡萄糖+200 mg·L^(-1)DMSO)和QDTS组(35 mmol·L^(-1)葡萄糖+200 mg·L^(-1)芪地糖肾方冻干粉),干预48 h后检测足细胞中NLRP3、GSDMD和IL-1β蛋白的表达水平。使用网络药理学方法构建QDTS治疗DN的药物-成分-靶标-疾病交互网络,分析其调控足细胞焦亡的关键信号通路并在体内、体外实验进行验证。结果:与正常组比较,模型组小鼠肾小球肥大,肾小球基底膜增厚,部分节段伴有明显足细胞足突融合,小鼠肾脏中NLRP3、GSDMD和IL-1β蛋白表达升高,小鼠肾脏中丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)、V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)和胱天蛋白酶-8(Caspase-8)蛋白表达升高(P0.05);与模型组比较,QDTS组小鼠肾脏病理损伤明显减轻,QDTS组和缬沙坦组小鼠肾脏中NLRP3、GSDMD和IL-1β蛋白表达降低(P0.05),QDTS组和缬沙坦组小鼠肾脏中MAPK14、RELA、Caspase-8蛋白表达降低(P0.05)。网络药理学结果显示QDTS调控DN细胞焦亡的靶点有16个,其中MAPK14、RELA和Caspase-8是关键靶点。与正常糖组比较,高糖组小鼠足细胞中NLRP3、GSDMD和IL-1β蛋白表达升高(P0.05),小鼠足细胞中MAPK14、RELA和Caspase-8蛋白表达升高(P0.05);与高糖组比较,QDTS组小鼠足细胞中NLRP3、GSDMD和IL-1β蛋白表达降低(P0.05),QDTS组小鼠足细胞中MAPK14、RELA和Caspase-8蛋白表达降低(P0.05)。结论:QDTS减轻DN足细胞损伤与其调控MAPK14/RELA/Caspase-8信号通路,抑制足细胞焦亡有关。