青蒿琥酯通过调控GADD45A、NACC1的表达抑制肝癌细胞的作用

作     者：沈冠彤 董金垚 冯璟 秦楠 杜根来 朱飞 连科 刘新宇 李清靓 张迅玮 师如意 SHEN Guan-tong;DONG Jin-yao;FENG Jing;QIN Nan;DU Gen-lai;ZHU Fei;LIAN Ke;LIU Xin-yu;LI Qing-liang;ZHANG Xun-wei;SHI Ru-yi

作者机构：山西医科大学基础医学院医学细胞生物学与遗传学教研室山西太原030001 山西省肿瘤医院肝胆胰胃外科山西太原030013 山西省人民医院消化科山西太原030012 山西中医药大学中药与食品工程学院山西晋中030619 山西白求恩医院(山西医学科学院同济山西医院)山西医科大学第三医院山西太原030032 

出 版 物：《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期：2024年第40卷第6期

页      面：1089-1097页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 0710[理学-生物学] 1006[医学-中西医结合] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 071007[理学-遗传学] 100214[医学-肿瘤学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：山西省基础研究计划(No 202103021224369) 山西省中医药管理局项目(No 2023ZYYC2043) 山西省研究生教育创新计划项目(No 2023KY397) 

主　　题：青蒿琥酯 肝细胞癌 抗癌作用机制 GADD45A NACC1 细胞凋亡 G_(2)/M 

摘      要：目的阐明青蒿琥酯(artesunate,ART)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)病理进程中对肿瘤细胞的作用及潜在的机制。方法用含不同浓度ART的培养基处理两种HCC细胞系MHCC-97H、HCC-LM3,以0 mg·L-1 ART处理的细胞作为对照组,对比ART对HCC的作用。采用MTT和克隆形成实验测定ART对HCC细胞生长能力的影响;划痕实验和Transwell实验分别检测ART对HCC细胞迁移和侵袭能力的影响;流式细胞术验证ART对HCC细胞凋亡和细胞周期变化的影响;通过转录组测序分析以及qRT-PCR验证关键基因的表达情况探究ART在HCC细胞中的可能作用机制。结果与对照组相比,ART处理后的肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭能力明显降低(P0.01),而细胞凋亡率明显上升,且G_(2)/M期细胞比例明显增高,提示肿瘤细胞被阻滞于该期。使用RNA测序数据进行转录组学分析,确定生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45A(growth arrest and DNA damage inducible alpha,GADD45A)是ART的潜在作用靶点,并且提示,ART可通过上调GADD45A的表达进而诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞。此外,生信分析结果提示,GADD45A与其上游转录因子伏隔核相关蛋白1(nucleus accumbens associated 1,NACC1)有蛋白互作现象,并且经ART处理后,GADD45A与NACC1的mRNA水平和蛋白水平均发生明显变化。结论ART可能通过影响GADD45A及其潜在上游NACC1基因的表达抑制HCC的发生发展。通过探究ART作用于HCC的功能影响及发生机制,为临床治疗肝癌提供新药物、新方向和新思路。