仰口线虫PCR检测方法的建立及应用

作     者：周璐露 要慧中 刘天缘 张佳琳 马丽 任洪英 杨钰莹 林青 ZHOU Lu-lu;YAO Hui-zhong;LIU Tian-yuan;ZHANG Jia-lin;MA Li;REN Hong-ying;YANG Yu-ying;LIN Qing

作者机构：西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 炉霍县农牧农村和科技局四川炉霍626500 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2024年第45卷第6期

页      面：15-19页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：陕西省农业农村厅省级农业专项资金项目(畜牧专项资金-XN14 畜牧防疫专项资金-XNDY2205) 

主　　题：山羊 仰口线虫 聚合酶链反应 ITS基因 虫卵检测 

摘      要：为特异性检测羊感染仰口线虫的情况,基于仰口线虫ITS基因序列设计特异性引物,进行退火温度及反应条件的优化,建立其属特异性PCR检测方法。应用该方法对仰口线虫、食道口线虫、毛尾线虫、捻转血矛线虫、细颈线虫、奥斯特线虫、夏伯特线虫、筒线虫、毛圆线虫的DNA样本进行扩增,仅能特异性扩增出仰口线虫的目的条带;该方法成功从仰口线虫中扩增出约500 bp的特异性片段,最低检测浓度为3.6×10^(3)copies/μL;该PCR检测方法对临床奶山羊粪便样品的检测结果显示,羊粪便样品中仰口线虫卵的阳性率为10%,且与显微镜镜检所得的结果一致。结果表明,建立的仰口线虫PCR检测方法敏感性较高且特异性良好,可以应用于临床羊粪便样品中仰口线虫的虫卵检测,为羊仰口线虫病的诊断与防治提供了一种技术支持。