深圳市2022—2023年输入性恶性疟原虫耐药基因突变情况

作     者：刘小莲 高世同 李媛 唐屹君 张倩 彭博 阳帆 张仁利 黄达娜 LIU Xiaolian;GAO Shitong;LI Yuan;TANG Yijun;ZHANG Qian;PENG Bo;YANG Fan;ZHANG Renli;HUANG Dana

作者机构：深圳市疾病预防控制中心广东深圳518055 

出 版 物：《中国热带医学》 (China Tropical Medicine)

年 卷 期：2024年第24卷第4期

页      面：382-387页

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：深圳医疗卫生“三名工程”项目(No.SZSM202211023)。 

主　　题：恶性疟原虫 输入性 耐药性 基因 突变 

摘      要：目的分析了解深圳市输入性恶性疟原虫耐药基因突变情况,帮助评估抗疟药的疗效和指导有效用药。方法收集2022—2023年从境外输入深圳市的恶性疟荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)阳性的样本85例,提取基因组DNA,使用巢式PCR扩增耐药基因:恶性疟原虫Kelch螺旋体蛋白基因(Plasmodium falciparum Kelch 13,PfK13)、多药耐药基因1(multidrug resistance 1,Pfmdr1)、氯喹抗性转运基因(chloroquine resistance transporter,Pfcrt)、二氢叶酸还原酶基因(dihydrofolate reductase,Pfdhfr)和二氢蝶酸合成酶基因(dihydropteroate synthase,Pfdhps),并进行双向测序,使用MEGA11.06软件分析这些耐药基因突变情况。结果研究发现PfK13错义突变(S549P)1例,同义突变4例。Pfmdr162.69%样本存在Y184F突变,未检测到N86Y突变体。Pfcrt基因中,未检测到72和73位点的突变,M74I、N75E和K76T突变分别占17.46%、15.87%和15.87%。Pfcrt基因野生型占主导(82.54%,52例),其次是I_(74)E_(75)T_(76)三重突变体(15.87%,10例)。Pfdhfr最常见的突变型为I_(51)R_(59)N_(108)(91.78%,67例),其次是野生型(2.74%,2例)。Pfdhps野生型占60.32%(38例),单突变K540E为最常见突变类型,检测到S436A、G437A、K540E、A581G、A613S、I431V、G556K、G579E位点突变。Pfdhfr-Pfdhps组合突变中,I_(51)R_(59)N_(108)-E540是频率最高的组合突变(11.48%),59.02%样本为Pfdhfr单独突变体。结论在本研究中,PfK13突变率低,且无报导的耐药突变,Y184F成为Pfmdr1突变主导,未发现有N86Y。Pfcrt野生型为主,其次为I_(74)E_(75)T_(76)三重突变体,Pfdhfr I_(51)R_(59)N_(108)三重突变非常普遍,本研究并未发现PfdhfrPfdhps完全抗性和超抗性突变体,但有其他的五重七重突变型。在未来的工作中,需要继续加强疟原虫耐药基因的监测,同时进一步结合体内疗效的监测来有效指导临床用药。