卵形巴贝斯虫与中华泰勒虫双重PCR检测方法的建立
Establishment and application of multiplex PCR method for detection of Babesia ovata and Theileria sinensis作者机构:吉林农业科技学院动物科技学院吉林132101
出 版 物:《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)
年 卷 期:2024年第32卷第2期
页 面:160-164页
学科分类:090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:吉林省教育厅科学技术研究项目(JJKH20230454KJ)
主 题:双重PCR 卵形巴贝斯虫 中华泰勒虫 AMA1 MPSP
摘 要:为建立一种能快速对卵形巴贝斯虫(Babesia ovata)和中华泰勒虫(Theileria sinensis)同时进行检测的双重PCR方法。根据GenBank已报道的卵形巴贝斯虫AMA1基因和中华泰勒虫MPSP基因设计合成了2对特异性引物,通过条件优化,建立了双重PCR检测方法。结果显示:双重PCR可特异扩增出卵形巴贝斯虫和中华泰勒虫目的条带,片段大小分别为500 bp和986 bp。该方法具有较好的特异性,对卵形巴贝斯虫和中华泰勒虫的最低检出浓度为16 fg/μL。对采集的90份牛血液样本进行双重PCR检测,卵形巴贝斯虫阳性率为30%(27/90),中华泰勒虫阳性率为16.67%(15/90),混合感染率为10%(9/90)。结果表明,双重PCR方法可用于卵形巴贝斯虫和中华泰勒虫的快速诊断和流行病学调查。