基于网络药理学与动物实验验证探究防己茯苓汤治疗心肌纤维化作用机制

作     者：石立鹏 邓静薇 杜旭勤 尹二谦 陈欣 SHI Lipeng;DENG Jingwei;DU Xuqin;YIN Erqian;CHEN Xin

作者机构：重庆医科大学中医药学院重庆400016 重庆中医药学院重庆402760 重庆市中医院重庆400021 

出 版 物：《中国中医药信息杂志》 (Chinese Journal of Information on Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2024年第31卷第5期

页      面：28-35页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100506[医学-中医内科学] 1005[医学-中医学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：中国博士后科学基金面上资助“地区专项支持计划”(2023MD744148) 重庆市自然科学基金(cstc2021jcyjbshX0215) 重庆市教委科学技术研究项目(KJQN202315105) 重庆医科大学中医药学院杏林计划项目(2021-ZDXK-DB03) 

主　　题：防己茯苓汤 心肌纤维化 网络药理学 PI3K/Akt/p65信号通路 小鼠 

摘      要：目的基于网络药理学方法探讨防己茯苓汤治疗心肌纤维化(MF)的潜在靶点和作用机制,并进行动物实验验证。方法通过TCMSP数据库检索并筛选防己茯苓汤药物活性成分,获取相应靶点,通过GeneCards、OMIM和DisGeNET数据库检索MF疾病靶点,二者取交集,获得防己茯苓汤治疗MF的潜在作用靶点,通过STRING数据库结合Cytoscape3.7.2软件构建蛋白相互作用网络,筛选核心靶点,使用DAVID数据库对核心靶点进行GO和KEGG通路富集分析。小鼠皮下注射异丙肾上腺素构建MF模型,予防己茯苓汤干预14 d,组织病理学方法观察心肌损伤和胶原沉积,ELISA检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10含量,RT-qPCR和免疫组化染色检测心肌组织PI3K/Akt/p65通路mRNA和蛋白表达,透射电镜观察心肌组织超微结构变化。结果共筛选出防己茯苓汤活性成分127个及其治疗MF靶点200个,Kanzonol F、甘草宁O、光甘草定等为主要活性成分,PIK3CA、AKT1、EP300等为核心靶点,与MF密切相关的富集通路为PI3K-Akt信号通路、细胞凋亡通路、FoxO信号通路、mTOR信号通路、细胞衰老、TGF-β信号通路等。与模型组比较,防己茯苓汤组小鼠心脏重量指数、心胫比和心肌细胞横截面积明显降低(P0.001);血清CK-MB含量明显降低(P0.01),促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量明显降低(P0.01,P0.05),抗炎细胞因子IL-10含量明显升高(P0.05);心肌组织炎症细胞浸润、心肌损伤、胶原沉积和纤维化程度明显减轻;RT-qPCR和免疫组化染色显示,防己茯苓汤明显降低心肌组织PI3K/Akt/p65通路mRNA和蛋白表达水平(P0.05,P0.001);透射电镜显示,防己茯苓汤可改善心肌组织超微结构,尤其是线粒体结构。结果防己茯苓汤通过KanzonolF、甘草宁O、光甘草定等活性成分,作用于PIK3CA、AKT1等靶点,调控PI3K/Akt/p65信号通路,发挥抗MF作用。