甜菜BvPCNA基因RNAi载体构建

作     者：王希 张西宁 陶艳昵 张琦 李志烨 赵春雷 WANG Xi;ZHANG Xining;TAO Yanni;ZHANG Qi;LI Zhiye;ZHAO Chunlei

作者机构：陇东学院生命科学与技术学院甘肃庆阳745000 甘肃省陇东生物资源保护利用与生态修复重点实验室甘肃庆阳745000 黑龙江大学现代农业与生态环境学院/中国农业科学院甜菜研究所哈尔滨150080 黑龙江省普通高等学校甜菜遗传育种重点实验室/黑龙江省甜菜工程技术研究中心哈尔滨150080 国家糖料改良中心/中国农业科学院北方糖料作物资源与利用重点开放实验室哈尔滨150080 

出 版 物：《中国糖料》 (Sugar Crops of China)

年 卷 期：2024年第46卷第2期

页      面：9-16页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：博士后研究人员落户黑龙江科研启动资助金“甜菜分子标记开发与重要性状相关标记的筛选”(LBH-Q18108) 2017年度黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科技创新类重点项目“甜菜分子标记位点库的深度挖掘与候选SSR标记开发”(KJCXZD201713) 财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系(糖料)建设项目“甜菜种质资源收集与评价”(CARS-170102)资助 

主　　题：甜菜 BvPCNA-like RNAi 载体构建 

摘      要：【目的】增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen, PCNA)在植物中广泛存在,但是其在植物中的功能研究较少。本研究可以为BvPCNA-like基因的功能分析奠定基础。【方法】课题组前期在甜菜基因组中克隆获得一个基因位点,命名为BvPCNA-like基因,本研究以BvPCNA-like基因的克隆载体为初始材料,选取适宜的靶序列,利用植物表达载体pFGC5941作为基础载体,使靶序列上游启动子为35 S,植物筛选标记为抗除草剂基因BlpR,设计靶序列特异性引物,采取PCR-酶切-连接方法,构建BvPCNA-RNAi载体。【结果】通过RCR鉴定表明已获得了预期目标载体,插入片段由正向靶序列BvPCNA-F、中间片段、反向靶序列BvPCNA-R组成,靶序列长度为320 bp。【结论】本研究所得载体适用于对双子叶植物进行遗传转化,可以作为BvPCNA-like基因理论研究或应用研究的载体材料。