小檗碱通过介导组蛋白去乙酰化酶4依赖的自噬参与保护造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤

作     者：李庆菊 左智 于然 陈佳佳 陈皓瑜 宋坚 王万鹏 Li Qingju;Zuo Zhi;Yu Ran;Chen Jiajia;Chen Haoyu;Song Jian;Wang Wanpeng

作者机构：南京医科大学康达学院附属医院涟水县人民医院中心实验室，淮安223400 南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院心内科，南京210029 

出 版 物：《中华生物医学工程杂志》 (Chinese Journal of Biomedical Engineering)

年 卷 期：2024年第30卷第1期

页      面：1-8页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82200387,81600549) 江苏省卫生健康委科研项目(Z2021059) 淮安市自然科学研究计划(联合专项HABL202260) 南京留学人员科技创新项目择优资助项目 

主　　题：小檗碱 造影剂诱导的急性肾损伤 羟基氯喹 自噬 组蛋白去乙酰化酶4 

摘      要：目的探讨小檗碱(BBR)对碘佛醇(Iv)处理的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的保护作用及其可能机制。方法体外培养HK-2,随机分为5组:对照组、Iv组、Iv+BBR组、Iv+BBR+自噬抑制剂羟基氯喹(HCQ)组(Iv+BBR+HCQ组)及Iv+组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)抑制剂他喹莫德(Tasq)组(Iv+Tasq组)。CCK8测定细胞存活率;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)试剂盒测定细胞凋亡率;mRFP-GFP-LC3腺病毒转染观察自噬流变化;免疫印迹和免疫共沉淀检测凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)、自噬标志蛋白(Beclin-1、LC3和泛素结合蛋白p62)及HDAC4-FoxO3a信号轴相关蛋白的表达。结果与对照组相比,Iv组细胞存活率下降,抗凋亡蛋白Bcl-2、p62、胞核FoxO3a表达下调(均P0.01);细胞凋亡率上升,Bax、Beclin-1、LC3、HDAC4、乙酰化FoxO3a(Ac-FoxO3a)和磷酸化FoxO3a(p-FoxO3a)表达上调(均P0.01)。BBR预处理后,可逆转Iv诱导的细胞活力下降和凋亡增加,并激活自噬。此外,在BBR联用HCQ后,相较于Iv+BBR组,LC3和p62蛋白升高,且自噬小体的数量增加及自噬溶酶体的数量减少;与BBR作用相同,Tasq预处理也可逆转Iv对上述HDAC4-FoxO3a信号轴相关蛋白的调控。结论BBR可通过增强自噬减轻Iv诱导的HK-2细胞凋亡及细胞损伤,其机制可能与调控HDAC4-FoxO3a信号轴相关。