3D生物打印构建HGFs和HUVECs共培养体系促进HUVECs成血管

作     者：李俊俊 王雯 郭慧颖 袁长永 夏廷旭 王鹏来 LI Junjun;WANG Wen;GUO Huiying;YUAN Changyong;XIA Tingxu;WANG Penglai

作者机构：徐州医科大学口腔医学院江苏徐州221004 徐州医科大学附属口腔医院种植科江苏徐州221000 

出 版 物：《口腔医学研究》 (Journal of Oral Science Research)

年 卷 期：2024年第40卷第4期

页      面：297-303页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 08[工学] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：国家自然科学基金项目(编号:82201071) 江苏省研究生科研与实践创新计划项目(编号:KYCX23_2949) 

主　　题：3D生物打印 成血管 组织工程 人脐静脉内皮细胞 人牙龈成纤维细胞 

摘      要：目的:构建人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)共培养体系,促进HUVECs成血管。方法:取HGFs和HUVECs培养传代至3~5代进行实验。通过慢病毒转染用红色荧光蛋白标记HUVECs。构建HGFs和HUVECs二维共培养体系,将HGFs与HUVECs以不同比例(4∶1、1∶1、1∶4)共培养,荧光显微镜下观察血管网络形成情况。配制5%甲基丙烯酰化明胶(GelMA)30胶,构建HGFs和HUVECs三维共培养体系,激光共聚焦显微镜下观察血管网络的形成情况。对HUVECs形成的血管网络进行定量分析。将HUVECs从三维共培养系统中分离出来,评估单独培养和共培养一定时间后HUVECs的增殖、迁移和小管形成效果以及相关血管生成基因的表达水平。结果:二维共培养时,当HGFs和HUVECs以比例1∶1共培养时血管网络形成的效果最佳。三维共培养时,HGFs可以促进HUVECs血管生成。HGFs和HUVECs共培养组的增殖、迁移和小管形成效果更好,相关血管生成基因的表达水平远远高于HUVECs单独三维培养组。结论:HGFs和HUVECs共培养能够引导和促进HUVECs出芽及迁移。