柱前衍生化RP-HPLC法测定醋酸戈舍瑞林的氨基酸组成

作     者：胡欣 林华庆 黄丹 许铭志 雷亦聪 

作者机构：广东药科大学广东省药物新剂型重点实验室 

出 版 物：《沈阳药科大学学报》 (Journal of Shenyang Pharmaceutical University)

年 卷 期：2024年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：广东省科学技术厅-广东省中医药科学院联合科研项目资助(2016A020226038) 

主　　题：醋酸戈舍瑞林 柱前衍生化 氨基酸水解 异硫氰酸苯酯 高效液相色谱 

摘      要：目的 建立一种测定醋酸戈舍瑞林的氨基酸组成的柱前衍生化RP-HPLC法。方法 醋酸戈舍瑞林在6 mol·L-1盐酸溶液、110℃条件下水解24h，水解后的氨基酸与异硫氰酸苯酯(PITC)50℃加热10min进行衍生化反应。氨基酸衍生物采用WatersSymmetry?C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)进行分析，流动相A为0.1mol·L-1乙酸钠缓冲液(pH6.5)-乙腈(体积比97:3)，流动相B为乙腈-水(体积比80:20)，梯度洗脱，流速为1.0mL·min-1，检测波长为254nm，柱温为35℃，进样盘温度为5℃，进样体积为20μL。结果 醋酸戈舍瑞林水解后的8种氨基酸的衍生物能够完全分离(分离度2.0)，且在25～250pmol·μL-1浓度范围内各氨基酸线性关系良好(r0.999)，重复性实验各峰面积RSD均小于5%，回收率均在90.3%～110.5%之间，供试品衍生化溶液在24h内稳定。用该方法测定3批不同厂家的醋酸戈舍瑞林，样品测定结果均符合欧洲药典的标准。结论 经方法学验证，该方法分离效果较好、准确度较高，适用于醋酸戈舍瑞林的氨基酸组成分析。