基于网络药理学与动物实验探究扶肾颗粒调控TLR4/NF⁃κB通路防治腹膜透析相关性腹膜炎的机制

作     者：邢海涛 丁凤玫 李佳琦 周千艺 杨洪涛 XING Hai-tao;DING Feng-mei;LI Jia-qi;ZHOU Qian-yi;YANG Hong-tao

作者机构：天津中医药大学第一附属医院天津300193 国家中医针灸临床研究中心天津300193 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2024年第49卷第6期

页      面：1621-1631页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81973799) 

主　　题：扶肾颗粒 腹膜透析 腹膜炎 网络药理学 TLR4/NF⁃κB通路 

摘      要：基于网络药理学与动物实验探究扶肾颗粒(Fushen Granules,FSG)抑制腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)大鼠炎症状态,防治腹膜透析相关性腹膜炎(peritoneal dialysis⁃related peritonitis,PDRP)的机制。通过中药系统药理学数据库与分析平台筛选扶肾颗粒主要活性成分并进行靶点预测,通过DisGeNET等数据库筛选PDRP相关靶点,利用在线软件作图工具平台获得药物与疾病靶点的交集靶点,并构建可视化扶肾颗粒⁃PDRP核心靶点蛋白⁃蛋白互作(PPI)网络,将得到的276个扶肾颗粒⁃PDRP的“药物⁃疾病共同靶点导入DAVID数据库进行基因本体(Gene Ontology,GO)功能与京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析,筛选出扶肾颗粒治疗PDRP的主要信号通路为TLR4/NF⁃κB;创建5/6肾切除尿毒症大鼠模型,术后2周起,每日定时给予实验大鼠腹腔注射20 mL 1.25%葡萄糖透析液建立PD大鼠模型,假手术组、模型组每日灌胃2 mL生理盐水,扶肾颗粒低(0.54 g·kg^(-1))、中(1.08 g·kg^(-1))、高(2.16 g·kg^(-1))剂量组每日灌胃2 mL,培菲康组每日灌胃2 mL(113.4 mg·kg^(-1))培菲康溶液,干预8周。试剂盒检测大鼠肾功能指标[血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)]含量,ELISA检测血清炎症因子[超敏C反应蛋白(hs⁃CRP)、肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)、白细胞介素(IL)⁃6]、脂多糖(LPS)、脂多糖结合蛋白(LBP)含量,苏木精⁃伊红(HE)染色观察结肠组织病理形态,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织TLR4/NF⁃κB信号通路关键因子LBP、Toll样受体4(TLR4)、NF⁃κB p65蛋白(NF⁃κB p65)、核因子抑制蛋白(IκBα)、TNF⁃α、IL⁃1β蛋白表达。结果显示,与假手术组比较,模型组结肠组织各层结构异常,肠绒毛稀疏、变短,黏膜层可见水肿,间隙变宽,局部发现炎症细胞明显浸润,体质量显著下降(P0.01),肾功能指标(Scr、BUN)含量均显著升高(P0.01),血清炎症因子(hs⁃CRP、TNF⁃α、IL⁃6)、LPS、LBP含量均显著升高(P0.01),LBP、TLR4、NF⁃κB p65、TNF⁃α、IL⁃1β蛋白表达显著升高(P0.01),IκBα蛋白表达显著降低(P0.01);与模型组比较,扶肾颗粒低、中、高剂量组与培菲康组大鼠结肠组织肠绒毛受损有不同程度减轻,黏膜下层水肿减轻,间隙变窄,固有层炎症细胞浸润减少,扶肾颗粒中、高剂量组及培菲康组肾功能指标(Scr、BUN)含量均显著降低(P0.05或P0.01),血清炎症因子(hs⁃CRP、TNF⁃α、IL⁃6)含量均显著降低(P0.05或P0.01),扶肾颗粒组与培菲康组血清LPS、LBP含量显著降低(P0.01),扶肾颗粒组LBP、TLR4、NF⁃κB p65、TNF⁃α、IL⁃1β蛋白表达显著降低(P0.05或P0.01),IκBα蛋白表达显著升高(P0.01),培菲康组LBP蛋白表达显著降低(P0.01)。结果提示,扶肾颗粒可保护PD大鼠残余肾功能,减轻炎症反应,保护结肠组织。基于网络药理学筛选出TLR4/NF⁃κB通路可能是扶肾颗粒治疗PDRP的主要信号通路。结果表明,扶肾颗粒通过调节PD大鼠结肠TLR4/NF⁃κB通路关键因子蛋白表达,改善肠道炎症反应、保护肠屏障防治PDRP。