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(-)-表儿茶素通过调控A549R细胞自噬改善放疗敏感性的作用机制

Mechanism of EC Regulation of Autophagy in A549R Cells to Improve Radiotherapy Sensitivity

作     者:黄梅芳 王俊峰 岳军 李田芊 繆怡 王淋 何永梅 康敏 母丽霞 李文辉 HUANG Meifang;WANG Junfeng;YUE Jun;LI Tianqian;MIAO Yi;WANG Lin;HE Yongmei;KANG Min;MU Lixia;LI Wenhui

作者机构:曲靖市第一人民医院云南曲靖655000 

出 版 物:《中华中医药学刊》 (Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期:2024年第42卷第3期

页      面:55-59,I0001-I0003页

学科分类:1005[医学-中医学] 100512[医学-针灸推拿学] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金项目(82160470) 云南省基础研究专项重点项目(202001AS070011) 云南省高层次人才培养支持计划“名医”专项(云厅字11号,YNWR-MY-2020-016) 

主  题:非小细胞肺癌 (-)-表儿茶素 放疗增敏剂 自噬 mTOR信号通路 

摘      要:目的 探讨(-)-表儿茶素[(-)-Epicatechin, EC]通过联合放疗(Radiotherapy, RT)改善非小细胞肺癌细胞放疗敏感性的作用机制。方法 体外培养A549人非小细胞肺癌细胞,构建放疗抵抗株A549R。通过细胞计数试剂盒8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测细胞增殖活力,脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling, TUNEL)染色观察细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞迁移能力。蛋白质免疫印迹(Western blot)检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3)和自噬相关蛋白(Beclin、LC3II/I)的表达。免疫荧光染色检测Cleaved Caspase-3和LC3的表达。单丹磺酰尸胺(Monodansylcadaverine, MDC)染色检测自噬体的形成。结果 EC联合RT抑制细胞增殖和迁移能力、诱导细胞凋亡和自噬、下调Bcl-2的表达、上调Bax、Cleaved Caspase-3、Beclin和LC3Ⅱ/I的表达,而加入自噬抑制剂(Chloroquine, CQ)或mTOR信号通路激活剂MHY1485处理后部分减弱了EC联合RT处理对细胞的作用。结论 EC可作为放疗增敏剂,通过抑制mTOR信号通路诱导A549R细胞自噬和凋亡改善放疗敏感性。

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