补虚化瘀方通过保护HiBECs细胞线粒体治疗原发性胆汁性胆管炎的作用机制研究

作     者：梁梦婷 景如斌 朱步坤 袁文洁 张玮 LIANG Meng-ting;JING Ru-bin;ZHU Bu-kun;YUAN Wen-jie;ZHANG Wei

作者机构：上海中医药大学附属龙华医院上海200032 

出 版 物：《时珍国医国药》 (Lishizhen Medicine and Materia Medica Research)

年 卷 期：2023年第34卷第12期

页      面：2841-2847页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81673926) 上海市卫计委面上项目(ZYKC201840234) 上海市浦东新区名中医工作室建设项目(PDZYXK-3-2014020) 

主　　题：原发性胆汁性胆管炎(PBC) 补虚化瘀方 胆管上皮细胞 凋亡 线粒体损伤 

摘      要：目的探讨补虚化瘀方治疗原发性胆汁性胆管炎(Primary Biliary Cholangitis,PBC)的效应机制及作用靶点。方法基于17β-雌二醇(β-Estradiol E2)100nM诱导人肝内胆管上皮细胞(Human intrahepatic bile duct epithelial cells Hi⁃BECs)48h,建立模拟PBC患者胆管上皮细胞线粒体损伤模型,并设空白对照组(Control组)、模型组(E2100nM组)、熊去氧胆酸(Ursodeoxycholic Acid,UDCA)组、补虚化瘀方中剂量组(TCM 1mg/mL)、补虚化瘀方高剂量组(TCM 5mg/mL)以及补虚化瘀方联合UDCA治疗组(UDCA+TCM 5mg/mL组),观察补虚化瘀方对E2诱导的HiBECs细胞凋亡的影响以及蛋白免疫印迹法(Westernblot WB)检测各组细胞线粒体凋亡途径相关蛋白及雌激素受体α(Estrogen Receptor Alpha ERα)、丙酮酸脱氢酶复合体E2(Pyruvate Dehydrogenase Complex E2 PDC-E2)的表达,荧光显微镜下观察各组细胞线粒体形态、线粒体膜电位及活性氧,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞内IL-6、IFN-γ和TNF-α炎症相关细胞因子表达,来评价补虚化瘀方对17β雌二醇诱导的HiBECs凋亡的影响研究。结果补虚化瘀方联合UDCA可明显下调E2(100nM)诱导的HiBECs细胞凋亡率及细胞内ERα、PDC-E2的表达,保护HiBECs细胞线粒体并减少炎症相关细胞因子表达。结论补虚化瘀方可通过改善线粒体损伤和细胞炎症反应,降低对17β雌二醇诱导的HiBECs凋亡,以高剂量为尤,联合UDCA后效果更优,降低了HiBECs细胞中ERα的表达,对HiBECs细胞线粒体具有一定的保护作用,对中医药治疗PBC提供了一定的理论依据和作用靶标。