基于免疫炎症-肠道微生态探讨清热解毒方对痛风小鼠治疗作用的研究

作     者：何宪顺 林锟 陆舜 韦雨柔 田佳庆 江禹来 魏腾飞 林天烨 何敏聪 魏秋实 HE Xianshun;LIN Kun;LU Shun;WEI Yurou;TIAN Jiaqing;JIANG Yulai;WEI Tengfei;LIN Tianye;HE Mincong;WEI Qiushi

作者机构：广州中医药大学第三临床医学院广州510378 广东省中医骨伤研究院广州510378 广州中医药大学第三附属医院广州510378 

出 版 物：《中国比较医学杂志》 (Chinese Journal of Comparative Medicine)

年 卷 期：2024年第34卷第5期

页      面：1-12页

学科分类：10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(82274544) 国家自然科学基金青年基金(82004392) 广东省自然科学基金面上项目(2023A1515010551) 广州中医药大学“双一流”与高水平大学学科协同创新团队培育项目(2021XK41) 广东省新黄埔中医药联合创新研究院2022年度第一批联合创新研究项目(2022IR012) 毕节市科学技术局2022年度“揭榜挂帅”项目(毕科合重大专项〔2022〕1号) 

主　　题：清热解毒方 免疫炎症 肠道菌群 痛风 高尿酸血症 

摘      要：目的探究清热解毒方对痛风小鼠抗炎作用及对肠道菌群的影响。方法将40只7~8周龄、体重20~22 g的SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为空白组(CON组)、模型组(MOD组)、别嘌醇组(ALLO组)、清热解毒方组(QRJD组),第1~35天每天早上CON组灌胃10 g/0.1 mL羧甲基纤维素,其余各组均灌胃氧嗪酸钾(500 mg/kg)+酵母膏(10 g/kg)混悬液制备高尿酸血症小鼠模型;第29天在异氟烷麻醉下,往CON组小鼠右踝关节注射50μL无菌羧甲基纤维素,其余各组小鼠右踝关节注射等量尿酸钠溶液(50 mg/mL)制备痛风性关节炎模型,同时各组每天灌服相应药物进行治疗;第35天取材,取材小鼠禁食不禁水6 h,检测血尿酸、血肌酐、尿素氮等血液指标,踝关节苏木精-伊红、番红-固绿染色;踝关节免疫组化检测白细胞介素-10(interleukin 10,IL-10)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)抗炎指标;收集小鼠盲肠内容物,采用16S rDNA高通量测序法检测肠道菌群变化。结果(1)用药治疗7 d后,与MOD组相比,QRJD组能有效降低疾病模型小鼠血尿酸(P0.05),而β多样性发现QRJD组的菌群组成更趋向于CON组水平(P=0.001)。(5)肠道菌群差异分析结果显示,与CON组相比,MOD组Ruminococcaceae spp.、Dubosiella sp.、Tyzzerella sp.、Ileibacterium sp.和Bacteroidales spp.等丰度增高(P0.05);与MOD组对比,QRJD组Lactobacillus sp.、Ligilactobacillus sp.和Bacteroides sp.等丰度上升(P0.05),且肠道菌群相互作用图显示菌群之间存在相互作用。(6)肠道菌群与肾功能、抗炎因子相关性分析中,Dubosiella sp.、Tyzzerella sp.、Bacteroidales spp.的相对丰度与SUA、SCR呈显著正相关(P0.05);而Lactobacillus sp.、Ligilactobacillus sp.、Mitochondria spp.与IL-10、TGF-β1抗炎因子呈正相关,其中与TGF-β1较为显著(P0.05)。(7)COG功能预测提示QRJD组功能集中于无机离子转运和代谢、碳水化合物运输与代谢等。结论QRJD能有效调节免疫炎症-肠道微生态紊乱从而治疗痛风疾病,推测其防治痛风的机制是调节肠道菌群多样性以及调控Ruminococcaceae spp.、Dubosiella sp、Lactobacillus sp.等差异菌群丰度实现治疗痛风的目的。