人TACI-linker-BR3双受体融合基因真核表达载体构建及其在COS-7细胞中的表达

作     者：王燕 窦恒利 曹伟娟 钱琤 梁艳 杨再兴 陆慧琦 朱烨 周晔 仲人前 WANG Yan;DOU Heng-li;CAO Wei-juan;QIAN Cheng;LIANG Yan;YANG Zai-xing;LU Hui-qi;ZHU Ye;ZHOU Ye;ZHONG Ren-qian

作者机构：第二军医大学长征医院实验诊断科解放军临床免疫中心上海200003 济南市第四医院外三科济南250031 

出 版 物：《第二军医大学学报》 (Academic Journal of Second Military Medical University)

年 卷 期：2006年第27卷第11期

页      面：1190-1195页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主　　题：BAFF APRIL TACI BR3 融合蛋白 真核表达 

摘      要：目的:构建人双受体融合基因真核表达载体———pcDNA3.1(+)-TACI-linker-BR3-IgGFc,观察其在COS-7细胞中的表达。方法:应用基因工程技术构建重组载体,脂质体转染COS-7细胞,通过Western印迹、ELISA以及免疫组化方法,检测目的蛋白的表达及其与BAFF、APRIL蛋白相互作用情况。结果:融合基因在瞬时转染的真核细胞中获得表达,并分泌至上清,转染效率能达到48%,融合蛋白能与BAFF、APRIL蛋白有效结合而且融合蛋白中分子标签IgGFc未影响双受体融合蛋白的结构及其生物学活性。结论:人TACI-linker-BR3双受体基因与IgGFc融合基因载体构建成功,表达的融合蛋白具有生物学活性,为进一步探讨SLE等自身免疫疾病的发病机制和生物学治疗方法奠定了基础。