苏云金芽孢杆菌Cry毒素共性结构短肽串联表达及功能分析

作     者：金嘉凤 沈成 孟萌 陈蔚 徐重新 刘媛 刘贤金 JIN Jiafeng;SHEN Cheng;MENG Meng;CHEN Wei;XU Chongxin;LIU Yuan;LIU Xianjin

作者机构：江苏大学食品与生物工程学院江苏镇江212013 江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所/省部共建国家重点实验室培育基地—江苏省食品质量安全重点实验室江苏南京210014 南京农业大学植物保护学院江苏南京210023 江苏大学生命科学学院江苏镇江212013 

出 版 物：《河南农业科学》 (Journal of Henan Agricultural Sciences)

年 卷 期：2024年第53卷第1期

页      面：96-104页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 

基　　金：江苏省自然科学基金面上项目(BK20231384) 国家自然科学基金项目(31972292) 江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(22)1009)] 

主　　题：Bt Cry毒素 共性结构 分子互作 杀虫活性 广谱抗体 棉铃虫 

摘      要：苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Cry毒素是一类具有抗虫功能的微生物蛋白。将前期基于Bt Cry毒素家族氨基酸序列及结构信息设计获得的呈现Cry毒素共性结构的3个短肽,拼接成为具有免疫原性的长链多肽(Bt Cry-GXJG-11),以期研发Bt Cry毒素杀虫功能的模拟物及制备Bt Cry毒素检测用广谱抗体的免疫原。分子建模预测结果显示,Bt Cry-GXJG-11与Bt Cry毒素靶标害虫棉铃虫(Helicoverpa armigera)钙黏蛋白受体(HaCad-TBR)存在互作效应,并初步明确了两者互作的关键氨基酸位点为244TYR。经原核表达,获得了质量浓度为0.5 mg/mL的Bt Cry-GXJG-11纯蛋白,测得其与HaCad-TBR的亲和力常数(KD)为2.151×10^(-7)mol/L。室内生测试验表明,Bt Cry-GXJG-11对棉铃虫具有一定杀虫活性,校正死亡率为27.5%;且以其免疫的小鼠血清能同时识别6种Bt Cry毒素(Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1Ah、Cry1B、Cry1C、Cry1F)。