半定量RT-PCR法评定不同生长阶段猪抗菌肽pr-39基因表达差异

作     者：汪以真 林文学 许梓荣 

作者机构：浙江大学饲料科学研究所动物分子营养学教育部重点实验室 浙江大学饲料科学研究所动物分子营养学教育部重点实验室 杭州310029 

出 版 物：《农业生物技术学报》 (Journal of Agricultural Biotechnology)

年 卷 期：2004年第12卷第1期

页      面：52-55页

核心收录：

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

基　　金：国家自然科学基金(No.30040036) 浙江省人才培养专项基金(No.RC01053) 

主　　题：半定量RT-PCR 猪 抗菌肽 pr-39 基因表达 

摘      要：根据已报道的猪抗菌肽pr-39基因和看家基因β-肌动蛋白(β-actin)基因序列,分别设计pr-39和β-actin的引物,探讨了PCR体系中适宜的MgCl2浓度、循环次数,以及2对引物间竞争情况。实验揭示,要保证半定量RT-PCR的可行性与可靠性,适宜的MgCl2浓度为2.5mmol/L,循环次数为29;由于2对引物之间的杂交配对,两对引物需分别进行扩增。根据以上信息构建一优化的半定量RT-PCR法,以β-actin为内标,研究不同生长阶段猪抗菌肽pr-39基因表达的差异。结果显示,不同生长阶段猪pr-39基因表达有差异,从出生到断奶前pr-39表达量呈增加趋势,断奶时表达量下降,断奶后随日龄增加pr-39表达量再逐渐增加。