恒古骨伤愈合剂对绝经后骨质疏松症模型大鼠炎症损伤及NF-κB/NFATc1信号通路的影响

作     者：余田甜 丰瑞兵 王晴 李朝文 陈家豪 蒋瑞轩 丁印帅 黄勇 胡昊 YU Tiantian;FENG Ruibing;WANG Qing;LI Chaowen;CHEN Jiahao;JIANG Ruixuan;DING Yinshuai;HUANG Yong;HU Hao

作者机构：湖北中医药大学武汉430060 湖北中医药大学附属湖北省中医院武汉430074 武汉体育学院健康学院武汉430079 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2024年第30卷第10期

页      面：62-69页

核心收录：

学科分类：08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100504[医学-方剂学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 100207[医学-影像医学与核医学] 1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100501[医学-中医基础理论] 100106[医学-放射医学] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：2023年度湖北省自然科学基金面上项目(2023AFB945) 湖北省自然科学基金创新发展联合重点项目(2023AFD126) 湖北省中医药管理局2023—2024年度中医药面上项目(ZY2023M005,ZY2023M004) 湖北省中医药管理局2023—2024年度中医药青年人才项目(ZY2023Q004) 2022年度湖北省自然科学基金创新发展联合基金项目(2022CFD147) 

主　　题：恒古骨伤愈合剂 绝经后骨质疏松症 核转录因子-κB/活化T细胞核因子信号通路 炎症损伤 

摘      要：目的:探析恒古骨伤愈合剂作用绝经后骨质疏松症(PMOP)的可能机制。方法:将40只成年雌性大鼠随机分为假手术(Sham)组、骨质疏松模型(OVX)组、雌二醇(E2)干预组、恒古骨伤愈合剂(OK)干预组,每组10只。通过常规背部双切口取卵巢术完成建模,1周后给予相应药物处理。12周后分别检测大鼠体质量、子宫指数,分别通过;苏木素-伊红(HE)染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色明确骨组织病理结构变化情况、破骨细胞(OC)数目。微计算机断层扫描技术(Micro-CT)检测骨密度(BMD)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁分离度(***)、骨体积分数(BV/TV)。三点弯曲实验检测股骨最大载荷。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及骨吸收标志物Ⅰ型胶原交联C-末端肽(CTX-1)的含量。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测通路相关蛋白核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、磷酸化核转录因子-p65(p-NF-κB p65)、核转录因子-κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化核转录因子-κB抑制蛋白α(p-IκBα)、活化T细胞核因子(NFATc1)、原癌基因(c-Fos)蛋白表达水平。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定OC相关特异性基因基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、NFATc1、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、组织蛋白酶K(CTSK)与c-Fos的mRNA表达水平。结果:与Sham组比较,OVX组子宫指数明显降低,体质量(BMI)显著升高,骨小梁结构彻底受损,OC数目提高,BMD、Tb.N、BV/TV、最大载荷下降,***上调,血清中TNF-α、CTX-1水平上调,c-Fos、p-NF-κB p65/NF-κB p65、NFATc1与p-IκBα/IκBα蛋白表达量增高,NFATc1、c-Fos、CTSK、TRAP、MMP-9 mRNA表达明显上调(P0.05,P0.01)。与OVX组比较,OK组、E2组大鼠体质量降低,子宫指数增高,骨小梁增多,OC数目下降,BMD、Tb.N、BV/TV、最大载荷增加,***下降,血清中TNF-α、CTX-1水平下降,c-Fos、p-NF-κB p65/NF-κB p65、NFATc1与p-IκBα/IκBα蛋白表达量减少,NFATc1、c-Fos、CTSK、TRAP、MMP-9 mRNA表达水平降低(P0.05,P0.01)。结论:恒古骨伤愈合剂能通过降低PMOP大鼠的炎症损伤因子水平,使NF-κB/NFATc1信号途径受抑,减少骨量丢失,是治疗PMOP的潜在作用机制之一。