人博卡病毒1型感染性克隆的构建及鉴定

作     者：杨暄 苏丽芳 王悦 王媛 董衍明 YANG Xuan;SU Lifang;WANG Yue;WANG Yuan;DONG Yanming

作者机构：湖北大学生命科学学院生物催化与酶工程省部共建国家重点实验室湖北武汉430062 湖北文理学院基础医学院湖北襄阳441053 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2024年第40卷第2期

页      面：485-495页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金(32070171) 湖北省自然科学基金(2020CFB831) 

主　　题：人博卡病毒 感染性克隆 人工合成 病毒复制 

摘      要：人博卡病毒1(human bocaparvovirus 1,HBoV1)为感染人并引起疾病的两种细小病毒之一。其感染2-5岁婴幼儿,能引起轻度或重度急性呼吸道疾病,严重时可危及生命。HBoV1基因组末端含末端反向重复序列(repeat the sequence in reverse, ITR),为病毒基因组复制所必需,但是难以进行PCR扩增合成。本研究通过分步合成末端ITR及分子克隆方法成功构建HBoV1的全长感染性克隆pSKHBoV1。经转染HEK293细胞后,分别从重要非结构蛋白的表达、病毒RNA转录后修饰与加工、病毒基因组复制水平以及子代病毒粒子基因组鉴定等方面,证实构建的感染性克隆在转染HEK293细胞后能够进入正常的复制周期并具有拯救出病毒粒子的潜力,这为后续研究HBoV1的复制增殖、病毒与宿主互作关系以及病毒疫苗的研发奠定了基础。