慢病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因／丙氧鸟苷体系抑制人晶状体上皮细胞的研究
The effect of ientivirus-mediated suicide gene therapy on lens epithelial cells作者机构：复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科200031 中国科学院上海细胞生物学研究所
出 版 物：《中华眼科杂志》 (Chinese Journal of Ophthalmology)
年 卷 期：2007年第43卷第9期
页 面：810-816页
核心收录：
学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学]
主 题：基因,转基因,自杀 慢病毒属 发光蛋白质类 单纯疱疹病毒属 胸苷激酶 晶体 上皮细胞
摘 要：目的探讨慢病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因／丙氧鸟苷体系（HSV—tk／GCV）对人晶状体上皮细胞（LECs）系的杀伤效应的机制。方法HSV—tk基因和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因共表达的慢病毒感染细胞为试验组，仅表达EGFP的慢病毒感染细胞和正常细胞为对照组。流式细胞仪检测病毒的转染效率，荧光显微镜观察及基因组PCR和RT-PCR检测基因在LECs内表达，DNA ladder和电镜观察该系统对LECs的杀伤作用，检测HSV—tk／GCV系统的浓度时间依赖性和旁观者效应。结果HSV—tk整合入LECs并高效表达。10～25μg／ml的GCV能明显诱导转染HSV—tk的细胞凋亡或坏死，且随GCV浓度升高和作用时间延长效应增强，且存在明显的旁观者效应，而对照组细胞无显著改变。当GCV浓度〉25μg／ml，对照组细胞的增殖也被显著抑制。结论GCV可高效杀伤表达HSV-tk的LECs，且旁观者效应显著增强了HSV—tk／GCV系统的杀伤效果。HSV—tk和EGFP共表达的慢病毒载体能高效稳定转染LECs。
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