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阴离子交换树脂固定化核酸酶P1的研究

Immobilization of nuclease P1 by anion exchange resin

作     者:王天赐 徐康 侯亚利 杨忠华 WANG Tianci;XU Kang;HOU Yali;YANG Zhonghua

作者机构:武汉科技大学化学与化工学院湖北武汉430081 

出 版 物:《生物加工过程》 (Chinese Journal of Bioprocess Engineering)

年 卷 期:2024年第22卷第1期

页      面:33-41页

学科分类:0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

基  金:国家自然科学基金(21376184) 湖北省教育厅科研基金重点项目(d20121108) 

主  题:核酸酶P1 树脂 固定化酶 交联 

摘      要:5′-核苷酸及其衍生物因具有较高的营养保健价值和药用价值,市场需求不断增大。核酸酶P1是目前5′-核苷酸工业生产的关键酶,但游离酶存在难以重复利用、消耗量过大等缺点。为了解决上述问题,提高核酸酶的利用效率,笔者利用不同类型树脂对核酸酶P1进行固定化。以核酸酶P1的吸附量和固定化酶的酶活为评价标准,研究发现阴离子交换树脂1(AER1)固定化时效果最佳,优化后的最佳固定化条件为酶量3 644.7 U/mL(2.2 mL)、戊二醛质量分数0.25%、交联时间1.5 h、固定化时间10.0 h、pH 5.1。该条件下制备的核酸酶P1的比酶活为47 980.95 U/g。在此最佳条件下,固定化酶的热稳定性有一定程度的提高;固定化酶的酸碱稳定性大幅度提高;固定化酶在4℃下保存6周后,酶活保留51.8%,是游离酶的1.6倍。

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