miRNA-126-3p调控人单核细胞白血病THP-1细胞的增殖和周期变化
miRNA-126-3p regulates the proliferation and cycle change of human monocytic leukemia THP-1 cells作者机构:山西医学科学院、山西白求恩医院、同济山西医院病案室太原030032 山西省肿瘤医院、中国医学科学院肿瘤医院山西医院、山西医科大学附属肿瘤医院放腹盆科太原030013 山西省肿瘤医院、中国医学科学院肿瘤医院山西医院、山西医科大学附属肿瘤医院中心实验室太原030013
出 版 物:《白血病.淋巴瘤》 (Journal of Leukemia & Lymphoma)
年 卷 期:2023年第32卷第12期
页 面:740-744页
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金:山西省科技厅基础研究计划(202203021221281) 山西省卫健委"四个一批"重点攻关专项(2022XM28) 山西省肿瘤医院科研创新团队建设项目(202003)
主 题:白血病 单核细胞 急性 miRNA-126-3p RGS3蛋白 人 细胞增殖 细胞周期
摘 要:目的探讨miRNA-126-3p(miR-126-3p)对人单核细胞白血病THP-1细胞增殖和周期的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-126-3p在THP-1细胞和从2022年5月至2023年1月山西省肿瘤医院收集的4名健康体检者外周血分离的单核细胞中的表达情况。构建过表达miR-126-3p载体,转染THP-1细胞(过表达miR-126-3p组),以转染空载体的THP-1细胞为对照。采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力,采用流式细胞术检测细胞周期。应用TargetScan软件预测miR-126-3p靶基因为RGS3,通过双荧光素酶报告基因实验进行验证。采用蛋白质印迹法检测过表达miR-126-3p组THP-1细胞RGS3蛋白表达水平。结果PCR检测结果显示,与健康人外周血分离的单核细胞相比,THP-1细胞miR-126-3p表达水平低(P0.05)。与对照组比较,过表达miR-126-3p组THP-1细胞在培养48 h和72 h后增殖能力均低(均P0.05),且细胞G1期阻滞[G1期细胞比例:(58.2±2.8)%比(44.1±2.4)%,P0.05]。双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-126-3p与RGS3的3’’UTR结合。蛋白质印迹法检测显示,过表达miR-126-3p组THP-1细胞RGS3蛋白表达水平低于对照组。结论miR-126-3p可能通过抑制RGS3表达而抑制人单核细胞白血病THP-1细胞增殖和促进细胞G1期阻滞。