蚀斑法测定呼吸道合胞病毒滴度的建立和验证

作     者：刘悦越 赵荣荣 赵慧 李淑艳 英志芳 邵铭 王剑锋 李长贵 LIU Yueyue;ZHAO Rongrong;ZHAO Hui;LI Shuyan;YING Zhifang;SHAO Ming;WANG Jianfeng;LI Changgui

作者机构：中国食品药品检定研究院呼吸道病毒疫苗室国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室北京102629 

出 版 物：《山西医科大学学报》 (Journal of Shanxi Medical University)

年 卷 期：2023年第54卷第11期

页      面：1515-1519页

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

基　　金：国家科技重大专项“重大新药创制”项目(2018ZX09739002) 

主　　题：呼吸道合胞病毒 病毒滴度 蚀斑法 微晶纤维素 方法验证 

摘      要：目的建立蚀斑法用于呼吸道合胞病毒的病毒滴度测定,并进行验证。方法通过测定样品的病毒滴度,比较滴度结果,筛选最佳覆盖物、覆盖物浓度和病毒孵育时间,从而建立蚀斑法用于测定呼吸道合胞病毒滴度。根据国际人用药品注册技术协调会指导原则和《中华人民共和国药典》要求,验证该方法的准确性、精密性、线性和耐用性。结果采用0.8%微晶纤维素作为覆盖物,病毒孵育2~3 h为建立蚀斑法的最优条件。该蚀斑法测定不同浓度样品病毒滴度的结果相对偏倚均小于10%;试验内和试验间精密性几何变异系数分别为11%和18%;本方法的线性斜率为1.004,相关系数为0.9991;本方法中固定细胞的时间0.5~24 h均适用,差异无统计学意义(F=1.767,P=0.2225)。结论建立的蚀斑法具有较好的准确性、精密性、线性和耐用性,适用于呼吸道合胞病毒的滴度测定。