许氏平鲉蛋白激酶B(SsAkt)基因的克隆及其mRNA在细菌胁迫后的表达规律

作     者：李兆龙 王腾腾 韩慧宗 陈钰臻 王斐 张明亮 孙硕 解维俊 姜海滨 LI Zhaolong;WANG Tengteng;HAN Huizong;CHEN Yuzhen;WANG Fei;ZHANG Mingliang;SUN Shuo;XIE Weijun;JIANG Haibin

作者机构：上海海洋大学水产与生命学院上海201306 山东省海洋资源与环境研究院山东烟台264006 

出 版 物：《渔业科学进展》 (Progress in Fishery Sciences)

年 卷 期：2024年第45卷第1期

页      面：47-59页

核心收录：

学科分类：0908[农学-水产] 09[农学] 

基　　金：财政部和农业农村部:现代农业产业技术体系专项(CARS-47) 山东省重点研发计划项目(2021LZGC028) 山东省自然科学基金(ZR2020QC202) 烟台市科技创新发展计划项目(2020MSGY073,2021XDHZ054)共同资助 

主　　题：许氏平鲉 蛋白激酶B Akt 基因克隆 表达规律 

摘      要：为研究蛋白激酶B(Akt)在许氏平鲉(Sebastes schlegelii)应答细菌胁迫过程中的作用,本研究应用PCR技术对许氏平鲉Akt基因(SsAkt)的编码区序列进行了克隆和特征分析,并应用实时荧光定量PCR技术检测了健康许氏平鲉各组织和细菌胁迫后肾脏、血液和肝脏中SsAktm RNA的表达规律。结果显示,SsAkt的开放阅读框(ORF)的长度为1440 bp,编码479个氨基酸,预测其蛋白的相对分子质量为55.80 k Da,理论等电点(p I)为5.64。SMART分析显示,Ss Akt蛋白含有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的3个特征性保守结构域和2个磷酸化位点。同源比对发现,Ss Akt与鱼类的同源性较高,与尖嘴鲈(Lates calcarifer)的相似度最高,为99.37%。组织表达分析显示,SsAkt在许氏平鲉健康组织(血液、鳃、肝脏、肌肉、肾脏、脾脏、肠、脑和心脏)中均有表达,在肾脏、脑和血液中的相对表达量较高。许氏平鲉响应细菌胁迫的表达结果显示,藤黄微球菌(Micrococcus luteus)感染后,SsAkt在3种组织中的表达明显上调,呈先上升后下降的趋势;鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染后,SsAkt在3种组织中呈现不同的表达趋势:在肾脏中,SsAkt的表达趋势为先上升后下降又上升再下降,而在血液和肝脏中的表达趋势为先上升后下降。以上研究表明,SsAkt响应了外源微生物对许氏平鲉的胁迫,在抵御外源微生物免疫应答过程中发挥重要作用。本研究结果为许氏平鲉的免疫机理研究奠定了基础。