纳米佐剂对树突状细胞活化效果的评估

作     者：赵莹 时洪艳 李明蔚 吴洋 闫浩鑫 郭龙军 冯力 ZHAO Ying;SHI Hong-yan;LI Ming-wei;WU Yang;YAN Hao-xin;GUO Long-jun;FENG Li

作者机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150069 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2023年第45卷第8期

页      面：853-858页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家重点研发计划(2021YFD1801105)。 

主　　题：纳米佐剂 交叉递呈 CD86 IL-12p40 IL-6 

摘      要：为评价新型纳米佐剂乳化抗原的免疫效果,本研究以FITC标记的卵清蛋白(FITC-OVA)为抗原,以新型纳米佐剂乳化制备OVA抗原(Nano-OVA),并将ISA 201佐剂乳化制备OVA抗原(201-OVA),抗原浓度均为100μg/mL。将10μL Nano-OVA和201-OVA分别加入小鼠骨髓源树突状细胞(DC2.4)中,2 h后收集细胞样品,利用流式细胞术检测各组DC2.4对OVA抗原的吞噬水平(FITC-OVA+%)及交叉递呈OVA抗原肽(SIINFEKL)水平(PE-25-D1.16+%)。将DC2.4分别与5μL Nano-OVA和201-OVA共孵育24 h后收集细胞样品,利用荧光定量PCR(qPCR)检测各组DC2.4共刺激分子CD86、细胞因子IL-12p40和IL-6 mRNA的转录水平。流式细胞术检测结果显示,与201-OVA组相比,Nano-OVA组DC2.4 FITC-OVA+%和PE-25-D1.16+%均极显著升高(P0.05)。将50μL Nano-OVA和201-OVA分别通过足垫皮下免疫BALB/c小鼠,12 h后剖杀各组小鼠分离其腘窝淋巴结,制备冷冻切片,利用免疫组化试验检测各组FITC-OVA在小鼠腘窝淋巴结中的分布,并利用Image J软件量化各组小鼠腘窝淋巴结FITC-OVA平均荧光强度。免疫组化试验结果显示,与201-OVA组相比,Nano-OVA组小鼠腘窝淋巴结FITC-OVA荧光分布更广;荧光强度观察结果显示,Nano-OVA和201-OVA组小鼠腘窝淋巴结中FITC-OVA的平均荧光强度差异不显著(P0.05),但均显著强于对照组(P0.05)。上述结果表明,Nano-OVA可更高效地被DC2.4吞噬、交叉递呈以及促进DC2.4的活化,诱导机体产生更强的免疫应答及靶向淋巴结的能力。本研究初步评估了新型纳米佐剂对DC的活化效果及其向小鼠淋巴结靶向引流FITC-OVA抗原的效果,为其临床应用提供参考依据。